睡眠呼吸暂停模式间歇低氧的程度及频对超氧化物歧化酶、丙二醛影响

论文摘要

目的探讨睡眠呼吸暂停间歇低氧模式下不同程度和频率对氧化应激反应的影响及相应的规律。为研究睡眠呼吸暂停及其心脑血管合并症氧化应激机制提供实验数据及理论依据。方法实验分为两部分。第一部分：将人脐静脉内皮细胞可传代细胞株ECV304置于细胞培养舱,以模拟睡眠呼吸暂停（Sleep Apnea, SA）模式低氧／再氧合模式,将舱内气体由计算机程控为不同程度与频率间歇低氧（Intermittent Hypoxia, IH）环境。细胞株分为1个间歇正常氧（对照组）和8个实验组（包括3个不同程度组及5个不同频率组）。不同IH程度分3组,频率固定为12次／h,即IH程度组1（10%02）、IH程度组2（1.5%02）及IH程度组3（0.5%组）。不同IH频率分5组,程度固定为1.5%02。频率组1（40次／h）；频率组2（20次／h）；频率组3（12次／h）；频率组4（9.23次／h）和频率组5（6.32次／h）。细胞暴露后以酶联免疫吸附法（Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay, ELISA）测定培养液中人超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase, SOD）及丙二醛（Malondialdehyde, MDA）浓度。第二部分：通过临床多导睡眠监测收集病例,设立1个正常对照组（A组）和轻度OSAS（B组）、中度OSAS（C组）、重度OSAS（D组）及重度OSAS合并高血压组（E组）4个实验组。记录OSAS组患者的呼吸暂停低通气指数（Apnea Hyponea Index, AHI）和最低血氧饱和度（Lowest Oxygen Saturation, LSO2）,并于次日晨起睡眠监测结束后采集静脉血,以ELISA法分别测定血清中SOD及MDA浓度。结果第一部分：①MDA水平在3个不同程度间歇低氧组均高于间歇正常氧组（P<0.01）,MDA随低氧程度增加呈逐渐升高（P<0.01）。SOD水平在3个不同程度间歇低氧组均低于间歇正常氧组（P<0.01）,SOD随低氧程度减低逐渐下降（P<0.01）。②SOD水平在低氧频率为40和20次每小时之间无统计学差异（P>0.05）,随低氧频率降低,SOD水平逐渐降低,至9.2次／小时达到最低,至6.3次／小时再次上升（P<0.01）；MDA水平在低氧频率为40／小时与20次／小时间无统计学差异（P>0.05）,之后随低氧频率降低,MDA水平逐渐升高,至9.2次／小时达到最高,至6.3次／小时再次轻度下降（P<0.01）。③正常氧与3个不同程度低氧组,SOD与MDA均值呈负相关（r=0.932,P=0.000）；不同频率低氧暴露下,5个不同频率组SOD与MDA均值呈负相关关系（r=0.832,P=0.000）。第二部分：①与正常对照组比较,不同程度OSAS各组SOD水平均降低（P<0.05）,而MDA水平均增高（P<0.05）。不同程度各组组间SOD及MDA水平两两比较均有统计学意义（P均<0.05）。SOD水平随着OSAS程度加重而降低,而MDA水平随着OSAS程度加重而升高。②SOD及MDA水平在重度OSAS患者与重度OSAS合并高血压组间比较差异有统计学意义（P<0.05）,SOD水平重度OSAS合并高血压组低于重度OSAS组,MDA水平重度OSAS合并高血压组高于重度OSAS患者③不同程度OSAS组SOD与MDA含量呈负相关（r=-0.857,P<0.01）,SOD与AHI呈负相关（r=-0.914,P<0.01）,SOD与LSO2呈正相关（r=0.752,P<0.01）,MDA与AHI呈正相关（r=0.921,P<0.01）,MDA与LSO2呈负相关（r=-0.864,P<0.01）。结论睡眠呼吸暂停模式下间歇低氧对细胞和机体存在的氧化应激反应增强,抗氧化能力减低具有低氧程度依赖性。不同频率间歇低氧暴露,氧化应激反应有随频率减低而增加,而后下降趋势,而抗氧化能力有有随频率减低而减低,而后上升的趋势,并非间歇低氧频率越高损伤越严重。间歇低氧暴露下上皮细胞出现氧化和抗氧化平衡的失调。对于睡眠呼吸暂停患者,随疾病严重程度加重,机体氧化损伤越严重,而同时机体的抗氧化能力越降低,OSAS患者的氧化应激反应和其疾病严重程度密切相关。OSAS合并高血压后氧化应激反应更加增强,而抗氧化能力进一步减弱,OSAS间歇低氧引起的氧化应激反应,可能在OSAS患者高血压发生上起重要作用。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 缩略语/符号说明
• 前言
• 研究现状、成果
• 研究目的、方法
• 一、间歇低氧对人脐静脉内皮细胞SOD及MDA的影响
• 1.1 材料与方法
• 1.1.1 细胞模型
• 1.1.2 实验材料和仪器
• 1.1.3 ECV304细胞培养及细胞模型的建立
• 1.1.4 暴露装置
• 1.1.5 气源系统
• 1.1.6 细胞处理方法
• 1.1.7 间歇低氧暴露方案
• 1.1.8 核蛋白抽提
• 1.1.9 BCA试剂盒测定蛋白浓度
• 1.1.10 ELISA法测定培基中SOD和MDA水平
• 1.1.11 统计学方法
• 1.2 结果
• 1.2.1 不同程度IH暴露ECV304血管内皮细胞分泌SOD、MDA水平比较
• 1.2.2 不同频率IH暴露ECV304血管内皮细胞分泌SOD、MDA水平比较
• 1.2.3 不同程度及频率IH暴露ECV304内皮细胞分沁SOD、MDA相关分析
• 1.3 讨论
• 1.4 小结
• 二、不同程度OSAS患者血清SOD及MDA表达水平的研究
• 2.1 对象和方法
• 2.1.1 研究对象
• 2.1.2 研究方法
• 2.1.3 统计学方法
• 2.2 结果
• 2的变化'>2.2.1 OSAS患者行睡眠监测后,其AHI和LSO₂的变化
• 2.2.2 不同程度OSAS患者及对照组血清SOD和MDA的变化
• 2的相关性分析及SOD与MDA的相关性分析'>2.2.3 OSAS患者SOD、MDA与AHI、LSO₂的相关性分析及SOD与MDA的相关性分析
• 2.3 讨论
• 2.4 小结
• 结论
• 参考文献
• 发表论文和参加科研情况说明
• 综述
• 阻塞性睡眠呼吸暂停综合征与氧化应激研究进展
• 综述参考文献
• 致谢