NR2B在骨癌痛小鼠脊髓背角和背根神经节中的表达及意义

论文摘要

目的通过观察骨癌痛小鼠疼痛行为学变化和脊髓背角与背根神经节NR2B受体表达情况,以及它们之间的相关性,探讨NMDA受体2B亚型NR2B在癌性痛产生和维持中的作用。方法选用体重约16-18g的成年雄性C57BL/6小鼠45只,随机分为三组,模型组（15只）:于小鼠股骨远端骨髓腔内接种Lewis肺癌细胞2×106个;假手术组组（15只）:接种等容积的D-HANK’S液;正常对照组（15只）:不予任何处理。接种容积均为10ul。术后3天始隔日观察小鼠自发痛行为及测定机械性触诱发痛和模型组肿瘤接种部位生长增大水平。术后第7、15、23天,分别在戊巴比妥钠（60mg/kg）麻醉下,4%多聚甲醛经心脏灌注后,取各组任选5只小鼠术侧后肢,分别作苏木素-伊红（HE）染色观察骨质破坏情况;取腰段脊髓膨大（L2-L4）和L4背根神经节（DRG）行NR2B免疫组化检测;取肿瘤侵犯组织和转移组织行苏木素-伊红（HE）染色观察肿瘤对小鼠其他组织的破坏情况。结果1)行为学结果:模型组接种后第7天左右出现自发痛行为,表现为接种侧后肢跛行、添足、自发抬足时间延长,出现轻微触诱发痛,术侧行走后足评分降低,并且伴有肿瘤接种部位组织增大呈黄豆大小;接种后第15天左右除了有自发痛现象外还出现明显的触诱发痛,表现为机械缩足阈值明显下降,且持续整个观察期,术侧行走后足评分进一步下降,肿瘤接种部位组织进一步增大呈蚕豆大小。接种后第23天小鼠肿瘤接种部位组织增大呈鸽子蛋大小,活动能力下降,托拽后肢行走。后肢组织学于7、15、23天可见肿瘤细胞部分或全部充满骨髓腔,并随时间延长逐渐穿破骨皮质向外生长,侵犯周围肌肉组织。模型组23天小鼠5只中有4只出现肿瘤向肺部、肾脏的转移,并以组织学证实。2)脊髓和L4 DRG NR2B免疫组化测定结果:模型组术侧脊髓NR2B染色7天、15天和23天免疫反应阳性指数分别为3.8±1.48、5.6±1.19、5.64±1.04,假手术组分别为1.60±0.55、1.75±0.79、1.8±0.84,正常组分别为1.66±0.41、1.64±0.40、1.60±0.44;模型组术侧L4 DRG NR2B染色7天、15天和23天免疫反应阳性指数分别为4.60±1.34、9.60±2.51、10.2±2.58,假手术组分别为2.0±1.22、1.80±1.10、2.0±1.22,正常组分别为2.1±1.52、1.80±1.10、1.90±1.24。分别与假手术组和正常组相比均有统计学差异（P<0.05）;而假手术组与正常组相比无统计学意义（P>0.05）;模型组中术侧7天与15天,7天与23天比较差异有统计学意义（p<0.05）,15天与23天比较差异无统计学意义（p>0.05）。各组小鼠术后第23天术侧脊髓背角NR2B免疫反应阳性指数与小鼠术侧后爪累计抬足时间明显正相关,r=0.976,P<0.001。与小鼠术侧机械性缩足阈值明显负相关,r=-0.879,P<0.001。各组小鼠术后第23天术侧L4 DRG NR2B免疫反应阳性指数与小鼠术侧后爪累计抬足时间明显正相关,r=0.882,P<0.001。与小鼠术侧机械性缩足阈值明显负相关,r=-0.760,P=0.001。结论在骨癌痛小鼠脊髓背角和DRG中NR2B受体表达均增加,且与行为学表现有明显的相关性,可以推测脊髓背角和DRG的NR2B受体表达增加在小鼠骨癌痛产生和维持中起到重要的作用。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 中英文缩略语对照表
• 第一章 前言
• 第二章 材料与方法
• 第三章 结果
• 第四章 讨论
• 第五章 结论
• 参考文献
• 附图
• 综述
• 综述参考文献
• 致谢
• 攻读硕士学位期间的研究成果