鸡消化道乳酸杆菌的黏附研究

论文摘要

本研究利用扫描和透射电镜对健康与患球虫（柔嫩艾美耳球虫）病鸡消化道中不同部位正常菌群黏附状况进行观察,结果发现,健康鸡消化道（嗉囊、回肠和盲肠部位）粘膜表面均匀覆盖着大量的正常菌群,尤其嗉囊表面黏附着致密的乳酸杆菌。并对乳酸杆菌黏附消化道上皮细胞的状态情况进行了观察;选取了高粘附性乳酸杆菌菌株（SDn A、SDnB7和SDnE1 ）;确定了乳酸杆菌SDn A株黏附消化道上皮细胞黏附因子性质;对乳酸杆菌SDn A株粘附配体蛋白和鸡消化道上皮细胞受体蛋白,进行了提取、纯化与鉴定;制备了兔抗鸡乳酸杆菌SDn A株黏附配体和上皮细胞受体蛋白血清;在此基础上测定了不同日龄和病鸡消化道中乳酸杆菌黏附配体和受体蛋白的含量;最后确定了影响乳酸杆菌粘附消化道上皮细胞的不同条件。本研究共分九部分。第一部分健康与患病鸡消化道中正常菌分布变化超微观察利用扫描电镜对健康与患球虫（柔嫩艾美耳球虫）病鸡消化道中正常菌群黏附状况进行了观察。结果发现,健康鸡消化道（嗉囊、回肠和盲肠部位）粘膜表面均匀覆盖着大量的正常菌群,尤其嗉囊表面黏附着致密的乳酸杆菌。回肠部位正常菌多而粘膜完整。而患球虫病鸡消化道（嗉囊、回肠和盲肠部位）粘膜已脱落,正常菌群数量明显减少。第二部分乳酸杆菌黏附消化道上皮细胞状态超微观察用扫描电镜对健康鸡嗉囊黏膜表面正常菌群与黏膜上皮细胞结合的状态进行了观察,结果发现,嗉囊黏膜表面覆盖着大量的乳酸杆菌,其表面以伪足样丝状物与嗉囊黏膜细胞紧密结合。同时用透射电镜对乳酸杆菌粘附CaCo-2cell的状态进行了观察,结果发现,上皮细胞与乳酸杆菌相结合后其结构未发生变化,菌体结构完整。第三部分宿主特异性高粘附性乳酸杆菌菌株筛选的研究选取5株鸡消化道乳酸杆菌株,分别与CaCo-2、MDCK、CEF cell结合3h和24h,观察其黏附性。结果表明,不同菌株与三种细胞的黏附效果不同。其中乳酸杆菌菌株SDnB7、SDnE1和SDnA黏附CaCo-2cell效果较好,而SDnA与SDnB1株黏附CEF cell效果较好,乳酸杆菌对MDCK cell几乎不黏附;菌株的培养时间长短对其黏附CaCo-2cell效果的影响试验表明,培养2d的乳酸杆菌黏附性较好;乳酸杆菌与CaCo-2 cell作用24h比作用3h黏附菌数多;不同菌株浓度（108、107、106、105和104个/ ml）对CaCo-2cell的黏附程度不同。108组的细胞黏附菌株数量较多。第四部分乳酸杆菌黏附肠道上皮细胞黏附因子性质的研究乳酸杆菌依靠表面的黏附物质黏附于肠道上皮细胞上。为了进一步确定黏附因子性

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 试验一 健康与患病鸡消化道中正常菌分布变化超微观察
• 摘要
• 引言
• 1. 材料与方法
• 2. 结果
• 3. 讨论
• 4. 小结
• 试验二 乳酸杆菌黏附消化道上皮细胞状态超微观察
• 摘要
• 引言
• 1. 材料与方法
• 2. 结果与分析
• 3. 讨论
• 4. 小结
• 试验三 宿主特异性高粘附性乳酸杆菌菌株筛选的研究
• 摘要
• 引言
• 1. 材料与方法
• 2. 结果与分析
• 3. 讨论
• 4. 小结
• 试验四 乳酸杆菌黏附肠道上皮细胞黏附因子性质的研究
• 摘要
• 引言
• 1. 材料与方法
• 2. 结果与分析
• 3. 讨论
• 4. 小结
• 试验五 乳酸杆菌粘附配体蛋白的提取、纯化与鉴定
• 摘要
• 引言
• 1. 材料与方法
• 2. 结果与分析
• 3. 讨论
• 4. 小结
• 试验六 乳酸杆菌黏附受体蛋白的提取、纯化与鉴定
• 摘要
• 引言
• 1. 材料与方法
• 2. 结果与分析
• 3. 讨论
• 4. 小结
• 试验七 不同日龄及病鸡消化道乳酸杆菌黏附配体蛋白含量研究
• 摘要
• 引言
• 1. 材料与方法
• 2. 结果与分析
• 3. 讨论
• 4. 小结
• 试验八 不同日龄及病鸡消化道乳酸杆菌黏附受体蛋白含量研究
• 摘要
• 引言
• 1. 材料与方法
• 2. 结果与分析
• 3. 讨论
• 4. 小结
• 试验九 影响乳酸杆菌粘附肠道上皮细胞的条件研究
• 摘要
• 引言
• 1. 材料与方法
• 2. 结果与分析
• 3. 讨论
• 4. 小结
• 结论
• 附1
• 附2
• 参考文献
• 致谢
• 攻读学位期间发表相关论文情况