论文摘要
本研究建立了鲫鱼血浆和肌肉中阿苯达唑及其主要代谢物阿苯达唑亚砜含量的HPLC检测方法,并对阿苯达唑及其亚砜在鲫鱼血浆中的药物动力学及肌肉中的残留消除规律进行了研究。本试验首先建立了鲫鱼血浆和肌肉中阿苯达唑及其亚砜含量的HPLC检测方法。血浆样品采用乙酸乙酯为提取剂,以乙腈:KH2PO4溶液（0.05mol/L）（33:67,V/V）为流动相进行HPLC分析。肌肉样品先用乙酸乙酯去蛋白,然后用正己烷去脂肪,最后以乙腈:KH2PO4溶液（0.05mol/L,pH3.5）=30:70（V/V）为流动相进行HPLC分析。阿苯达唑及其亚砜在血浆中的平均回收率分别为83.65%～86.92%、82.93%～97.45%,变异系数范围分别为3.40%～3.70%、4.16%～4.53%,最低检测限（LOD）分别为0.05、0.00625mg/L,定量限（LOQ）分别为0.1、0.0125mg/L;在肌肉中的平均回收率分别为82.39%～85.82%、84.60%～97.25%,变异系数范围分别为2.59%～5.26%、2.46%～4.36%,最低检测限分别为0.05、0.00625mg/kg,定量限分别为0.1、0.0125mg/kg。选用100尾健康鲫鱼,随机分成20组,进行药动学和残留消除规律的研究。药动学组鲫鱼单剂量（12mg/kg b.w.）口服给药,于给药后不同时间（12、20、26、34、36、38、44、48、60、72、96h）从鲫鱼尾静脉采集血样。残留分析组多剂量（12mg/kg b.w.）口服给药,连续给药5天,于给药结束后不同时间（0.5、1、2、4、8、12、24d）采集鲫鱼肌肉样品。用反相高效液相（RP-HPLC）色谱法测定血浆和肌肉中阿苯达唑和阿苯达唑亚砜的浓度。采用3p97药动学程序软件处理药-时数据。鲫鱼单剂量口服阿苯达唑后,阿苯达唑亚砜血药浓度-时间数据符合一级吸收一室开放模型,其主要动力学参数分别为:t1/2（ka）10.91±1.33h,t1/2（ke）11.95±1.24h,T（peak）16.46±1.84h , Ka0.06±0.01h-1 , Ke0.06±0.01h-1 , C（max）0.28±0.07mg/L ,AUC12.56±4.14mg/L·h。结果表明,在15～18℃水温条件下,阿苯达唑亚砜在鲫鱼体内吸收缓慢,分布容积小,半衰期和滞留时间较长,血药浓度较低。残留消除试验中,在20±1℃水温条件下,鲫鱼多剂量口服阿苯达唑,停药后第4d肌肉中阿苯达唑亚砜的浓度达到0.787mg/kg,第8d降至0.064mg/kg,第24d肌肉中亚砜含量低于检测限（0.00625mg/kg）,所以在此温度下,鲫鱼多剂量口服阿苯达唑后休药期至少为24d。