论文摘要
目的:吗啡（morphine）是从罂粟的果实中提取的主要生物碱之一（含量约10-15%）。以往研究表明吗啡具有镇痛、镇静、止泻、抗心源性哮喘等药理作用。已有报导吗啡可激活K+通道、抑制电压门控Ca2+通道,但吗啡是否可作用于酸敏感离子通道（ASICs）影响其功能和表达尚未见报道。本研究旨在观察吗啡对大鼠三叉神经节ASICs电流幅值与蛋白表达的影响,并进一步探讨其作用机制。方法:急性分离三叉神经节神经元细胞,利用全细胞膜片钳技术,观察不同浓度的吗啡对ASIC1,ASIC3电流的影响。建立福尔马林炎性痛模型,利用western blotting方法,观察炎症时吗啡对三叉神经节ASIC1,ASIC3蛋白表达的影响。结果:吗啡能抑制急性分离的大鼠三叉神经节神经元细胞ASIC1,ASIC3的电流幅值,且其抑制作用呈现出浓度依赖性;吗啡还能降低生理条件以及炎性痛时ASIC1,ASIC3的蛋白表达水平。结论:吗啡通过抑制ASICs电流幅值和蛋白表达,从而发挥镇痛作用。目的:阿片受体属G蛋白偶联受体,其配体是阿片肽物质。阿片受体有许多亚型,最常见的三种经典亚型为μ、δ、κ受体。阿片受体在人体内广泛存在,有着复杂的生物学效应。已知吗啡可通过作用于阿片受体引起神经细胞膜上的某些离子通道开放,导致某些离子的跨膜转运而发挥镇痛作用。本研究旨在观察阿片受体在吗啡影响ASICs电流幅值和蛋白表达过程中的作用,进一步探讨吗啡镇痛的机制。方法:首先利用全细胞膜片钳技术记录稳定表达ASIC1a的CHO细胞上的ASIC1a电流,然后给予0.3μM/L,1μM/L,3μM/L,10μM/L的吗啡,再观察ASIC1a电流的变化情况。建立福尔马林炎性痛模型,利用western blotting方法,观察给予吗啡和纳洛酮干预后,三叉神经节ASIC1,ASIC3蛋白表达的变化情况。结果:吗啡能抑制中国仓鼠卵巢细胞的ASIC1a电流,且其抑制作用呈现出浓度依赖性,其半数抑制浓度为1.35±0.57μmol/L, Hill系数为1.08±0.37。吗啡能降低炎性痛时ASIC1,ASIC3的蛋白表达水平,而且此作用不能被纳洛酮所阻断。结论:吗啡抑制ASICs电流幅值和蛋白表达的作用与阿片受体无关,即其镇痛作用可能是阿片受体非依赖性的。
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