顺铂对替尼泊甙杀伤小细胞肺癌细胞的影响

论文摘要

目的:探讨DNA拓扑异构酶II （topoisomerase II, Topo II）及特化蛋白1（Specificity protein-1, Sp1）在顺铂（cisplatin,CDDP）对替尼泊甙（tineposide, VM-26）杀伤小细胞肺癌（small cell lung cancer, SCLC）细胞影响过程中的表达。方法:将H446 细胞（人SCLC 细胞系）于37℃,5% CO2,饱和湿度,含10% 新生牛血清的RPMI 1640 条件下传代培养,待细胞进入对数生长期后进行实验操作。应用MTT 法,分别测定CDDP 血浆峰浓度与不同浓度VM-26 合用对H446细胞24 小时的抑制率,应用金氏公式分析药物合并效应;采用AO/EB 双荧光染色观察细胞活率:配制吖啶橙（AO）和嗅乙啶（EB）各为0.05 mg/ml 的混合染液。加荧光染液于细胞悬液内,吹打混匀、滴至载玻片上,荧光显微镜下观察、照相,分别计算细胞活率;采用Hoechst 33258 荧光染色观察细胞凋亡率:药物作用H446 细胞24 小时后,EDTA 消化,制成1×105 /ml 单细胞悬液,经甲醇:冰乙酸（3:1）4℃固定5分钟,滴加至载玻片上干燥,加Hoechst 33258染色30 分钟,蒸馏水洗片去除多余液体、封片剂封片,置荧光显微镜下观察、照相;采用琼脂糖凝胶电泳检测DNA 断裂:H446细胞经药物作用24 小时后收集细胞,生理盐水洗涤两次,加入细胞裂解液,4℃裂解30 分钟;加入RNA 酶（50μg/ml）37℃1 小时,蛋白酶K, 50℃3 小时;以酚-氯仿法抽提DNA,3mol/L 乙酸纳、无水乙醇沉淀DNA,离心后,70%

论文目录

• 英文摘要
• 英文缩写
• 研究论文 顺铂对替尼泊甙杀伤小细胞肺癌细胞的影响
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 附图
• 附表
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述
• 致谢
• 个人简历