论文摘要
背景与目的:胃癌是我国常见恶性肿瘤之一,其死亡率为20.93/10万,腺癌属最常见的胃癌。恶性肿瘤的生长、侵袭、转移都依赖于肿瘤新生血管的生成,引起患者死亡的主要原因是肿瘤的侵袭与转移.血管生成对实体肿瘤的快速生长和转移非常重要,也是肿瘤研究的热点。研究表明,在肿瘤血管生长过程中,血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor,VEGF）起着重要的作用。胎盘生长因子（placenta gro-wth factor,PIGF）系VEGF家族新成员,已发现在一些肿瘤中有不同程度的表达,但对胃癌的研究相对缺乏资料,本试验通过对胃癌及癌旁组织的VEGF、PIGF的表达研究,探讨VEGF、PIGF在胃癌及癌旁组织的表达水平之间的相关性,以进一步明确胃癌预后影响因素,指导临床治疗提高患者生存率。材料及方法:1.材料96例胃腺癌标本来自沈阳军区总医院,时间从2004年至2006年,年龄从23到72岁不等,男57例,女39例,所选蜡块重新切片,HE染色及形态学复习。2.方法免疫组化方法:P1GF多克隆抗体购自美国SantaCruz公司,CD34、VEGF单克隆抗体均由上海长岛试剂公司提供,采用链霉菌抗生物素蛋白一氧化物酶连接法（Streptavidin/Peroxidase,SP）按常规步骤进行,除—抗分别为CD34、VEGF、P1GF外,其余步骤均相同。阴性对照采用0.01MPBS液体代替一抗,其他步骤不变,阳性对照采用内对照。3.结果判定3.1肿瘤微血管密度（MVD）判断标准:CD34标记微血管,计算肿瘤内着色的毛细血管和微小血管。按照Weidner[1]的评判标准,凡呈现棕色单个内皮细胞或内皮细胞簇均作为1个血管计,但肌层较厚及管腔面积大于8个红细胞直径的血管不计数。计数方法:在200倍视野下计数每个视野内CD34阳性血管数,每例随机选择4个不重复的视野进行计数,求出平均值,计算每例单位视野内平均血管数,即为该例肿瘤的微血管密度（microvessel-density,MVD）值（个/x200）.3.2 VEGF、PIGF判断标准:VEGF与PIGF均在以细胞浆呈现棕黄色着色,CD34表达阳性为血管内皮细胞被染成黄褐色.3.3统计分析:数据统计应用SPSSll.5软件,采用x2检验、t检验和Spearman等级相关分析。结果:VEGF在47.92%（46/96）的胃癌组织表达, VEGF阳性的胃癌组织MVD为31.4±8.5/高倍视野.VEGF阴性组织中MVD为19.22±8.2/高倍视野,两者差异有显著性（P < 0.01）.PIGF阳性胃癌组织MVD为34.1±1.4/高倍视野,PIGF阴性胃癌组织为30.8±2.6/高倍视野,两者差密度计数（MVD）明显高于癌旁组织（P<0.05）,胃癌中PIGF、VEGF蛋白表达阳性率和MVD呈明显增高.PIGF、VEGF蛋白表达和MVD与胃癌的肿瘤分级有差异（P<0.05）。免疫组化检测结果发现,在96例胃癌中。VEGF在胃癌的表达与癌旁组织存在显著性差异（P<0.01）。低分化型胃癌MVD值也明显高于中、高分化型胃癌（P<0.05）,而后两者MVD值之间差异无显著性（P>0.05）。相关分析发现,在胃癌中,VEGF表达与MVD值呈明显正相关（r=0.541,P<0.01）,PIGF表达与MVD值亦呈明显正相关（r=0.392,P<0.01）,。结论:1. VEGF在三型胃癌组织与癌旁组织中均有不同程度的表达,两者有差异性。VEGF在低分化腺癌与中、高分化腺癌之间有差异性。2. PIGF在三型胃癌组织与癌旁组织中均有不同程度的表达,两者有差异性。PIGF在低分化腺癌与中、高分化腺癌之间有差异性。3. VEGF、PIGF在三型胃癌,尤其是低分化的胃癌血管生成中发挥协同作用,两者之间有相关性。对于今后进一步应用抗血管新生药物治疗胃癌,提高患者生存率提供了一条新途径。