论文摘要
目的1.研究重症肌无力患者外周血中Thl7细胞和IL-17的水平与疾病的关系。2.进一步探讨Th17细胞和IL-17在重症肌无力发病机制中的作用。方法1.选择确诊的重症肌无力患者26例,分为全身型组和眼肌型组,其中全身型12例,眼肌型14例并设健康对照组10例。全身型和眼肌型组重症肌无力患者均行QMG评分量表评分。2.分别取上述三组研究对象的新鲜外周静脉血4ml,用EDTA抗凝,取2m1全血3h内进行单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)提取,剩余2m1离心1000转×10分钟,收集血清,分装后-20℃冷冻保存。3.应用直接免疫荧光法标记抗人CD4抗体和人PE标记的IL-17A,结合流式细胞术检测上述研究对象的外周血Thl7细胞的水平。4.应用酶联免疫吸附分析法(Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay, ELISA)同期检测上述患者和健康对照组的血浆IL-17的浓度。5.应用SPSS软件,将全身型、眼肌型重症肌无力患者和健康对照组Th17细胞和IL-17水平进行统计学分析比较,并将重症肌无力患者的Th17细胞和IL-17水平进行相关性分析;将Th17细胞和IL-17水平分别与患者QMG评分量表、病程、发病年龄等临床情况进行相关性分析。结果1.三组资料一般资料比较,性别差异(x2=0.619,P=0.734>0.05),年龄差异(t=-2.172,P=0.06>0.05)尚不能认为三组间性别,年龄的差异有统计学意义,眼肌型与全身型组病程的差异(t=-1.221,P=0.234>0.05)尚不能认为两组间病程差异有统计学意义,眼肌型与全身型评分的差异(t=-6.550,P=0.01<0.05)可以认为两组评分差异有统计学意义。2.眼肌型、全身型重症肌无力患者及健康对照组的Th17差异无统计学意义(P=0.375>0.05)。3.眼肌型、全身型重症肌无力患者及健康对照组的IL-17浓度差异无统计学意义(P=0.711>0.05)。4.重症肌无力患者Th17与IL-17相关系数为(γ=0.879,P=0.000<0.05),两者间存在明显相关。5.重症肌无力患者Th17与病程及发病年龄均无相关性(P>0.05);同样IL-17与病程及发病年龄均无相关性(P>0.05)。眼肌型QMG评分与Thl7和IL-17无相关(P>0.05);全身型QMG评分与Thl 7和IL-17相关(P<0.05)。结论1.MG患者Th17与IL-17两者间存在明显相关,进一步验证了Th17细胞是以分泌IL-17为特点的新的CD4+T细胞,IL-17是Th17的效应因子。2.MG眼肌型、全身型及健康对照组Th17的差异无统计学意义,为阴性结果。MG眼肌型、全身型患者及健康对照组1L-17差异无统计学意义,可以看到MG患者血清IL-17浓度较健康对照组略高,但两组没有统计学差异。与实验性自身免疫性重症肌无力中检测的结果不一致。3.本实验中出现的结果与实验性自身免疫性重症肌无力不一致,可能的原因包括:考虑为在人体中由于Th1细胞功能相对保留的条件下,Th17功能表现不明显。另外Thl细胞可能通过细胞介导和抗体介导途径在MG的发病机制中都起重要作用,而Th17在重症肌无力中可能不起决定性作用。而且本研究中的样本量较小,尚需大样本的研究进一步证实。4.重症肌无力患者Th17与病程及发病年龄均无相关性,同样IL-17与病程及发病年龄均无相关性;眼肌型QMG评分与Thl7和IL-17无相关,全身型QMG评分与Th17和IL-17两者间存在明显相关,考虑Thl7和IL-17含量的增高可能在一定程度上能够反映疾病的严重程度和进程。
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