本文主要研究内容
作者佘春,张艳,张彩玉,尹桂军,石德顺,李湘萍（2019）在《猪SMYD3基因的克隆、序列分析及其对猪成纤维细胞增殖的影响》一文中研究指出：试验旨在克隆猪SMYD3(SET and MYND domain-containing protein 3)基因并对其进行序列分析,研究其对猪成纤维细胞增殖的影响。首先克隆猪SMYD3基因,根据其他物种SMYD3基因siRNA和shRNA序列,经同源性比对分析,获得两条猪SMYD3基因shRNA序列,分别构建pSicoR-GFP-SMYD3 shRNA1/shRNA2表达载体,转染HEK293T细胞,利用实时荧光定量PCR分析干扰效率,筛选出抑制效率较好的shRNA,并构建pLVX-IRES-ZsGreen1-SMYD3及pSicoR-GFP-SMYD3 shRNA真核表达载体,同时分析SMYD3基因对猪成纤维细胞的增殖作用,检测细胞Nanog、DNMT1及DNMT3a基因表达情况。结果显示,试验克隆得到1 404 bp的猪SMYD3基因编码区序列,生物信息学分析发现,德保猪SMYD3基因与野猪、山羊和野耗牛相应氨基酸序列的同源性分别为99.5%、93.8%和92.9%。shRNA1/shRNA2均能显著抑制SMYD3基因表达(P<0.05),抑制效果分别是34%和54%,选择pSicoR-GFP-SMYD3 shRNA2进行后续研究。通过脂质体转染法将构建的pLVX-IRES-ZsGreen1-SMYD3及pSicoR-GFP-SMYD3 shRNA真核表达载体导入HEK293T细胞,均可观察到清晰的绿色荧光。慢病毒感染细胞及实时荧光定量PCR结果显示,与空白对照组及阴性对照组相比,过表达SMYD3基因促进猪成纤维细胞增殖,Nanog和DNMT1基因表达显著升高(P<0.05);抑制SMYD3基因表达,细胞增殖受到抑制,Nanog、DNMT1、DNMT3a基因表达显著降低((P<0.05),说明SMYD3基因的表达与猪成纤维细胞的增殖显著相关。
Abstract
shi yan zhi zai ke long zhu SMYD3(SET and MYND domain-containing protein 3)ji yin bing dui ji jin hang xu lie fen xi ,yan jiu ji dui zhu cheng qian wei xi bao zeng shi de ying xiang 。shou xian ke long zhu SMYD3ji yin ,gen ju ji ta wu chong SMYD3ji yin siRNAhe shRNAxu lie ,jing tong yuan xing bi dui fen xi ,huo de liang tiao zhu SMYD3ji yin shRNAxu lie ,fen bie gou jian pSicoR-GFP-SMYD3 shRNA1/shRNA2biao da zai ti ,zhuai ran HEK293Txi bao ,li yong shi shi ying guang ding liang PCRfen xi gan rao xiao lv ,shai shua chu yi zhi xiao lv jiao hao de shRNA,bing gou jian pLVX-IRES-ZsGreen1-SMYD3ji pSicoR-GFP-SMYD3 shRNAzhen he biao da zai ti ,tong shi fen xi SMYD3ji yin dui zhu cheng qian wei xi bao de zeng shi zuo yong ,jian ce xi bao Nanog、DNMT1ji DNMT3aji yin biao da qing kuang 。jie guo xian shi ,shi yan ke long de dao 1 404 bpde zhu SMYD3ji yin bian ma ou xu lie ,sheng wu xin xi xue fen xi fa xian ,de bao zhu SMYD3ji yin yu ye zhu 、shan yang he ye hao niu xiang ying an ji suan xu lie de tong yuan xing fen bie wei 99.5%、93.8%he 92.9%。shRNA1/shRNA2jun neng xian zhe yi zhi SMYD3ji yin biao da (P<0.05),yi zhi xiao guo fen bie shi 34%he 54%,shua ze pSicoR-GFP-SMYD3 shRNA2jin hang hou xu yan jiu 。tong guo zhi zhi ti zhuai ran fa jiang gou jian de pLVX-IRES-ZsGreen1-SMYD3ji pSicoR-GFP-SMYD3 shRNAzhen he biao da zai ti dao ru HEK293Txi bao ,jun ke guan cha dao qing xi de lu se ying guang 。man bing du gan ran xi bao ji shi shi ying guang ding liang PCRjie guo xian shi ,yu kong bai dui zhao zu ji yin xing dui zhao zu xiang bi ,guo biao da SMYD3ji yin cu jin zhu cheng qian wei xi bao zeng shi ,Nanoghe DNMT1ji yin biao da xian zhe sheng gao (P<0.05);yi zhi SMYD3ji yin biao da ,xi bao zeng shi shou dao yi zhi ,Nanog、DNMT1、DNMT3aji yin biao da xian zhe jiang di ((P<0.05),shui ming SMYD3ji yin de biao da yu zhu cheng qian wei xi bao de zeng shi xian zhe xiang guan 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自中国畜牧兽医的佘春,张艳,张彩玉,尹桂军,石德顺,李湘萍，发表于刊物中国畜牧兽医2019年03期论文，是一篇关于基因论文,猪成纤维细胞论文,细胞增殖论文,中国畜牧兽医2019年03期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自中国畜牧兽医2019年03期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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