论文摘要
在细胞增殖通路中,表皮生长因子（EGF）的作用通路已被广泛研究。它通过自身受体EGFR-ras途径向下游传递有丝分裂信号,通过激活丝裂原活化蛋白激酶家族（MAPKs）,调节增殖相关的转录因子（如c-myc, c-fos）促进细胞增殖分化。其中,胞外信号调节激酶1/2（ERK1/2）是传递EGF促有丝分裂信号的关键酶。值得注意的是磷脂酶A2（PLA2）家族中重要一员胞浆型PLA2（cPLA2）可被ERK1/2磷酸化激活。在以往研究中已证实,PLA2水解膜磷脂的产物花生四烯酸（AA）及其代谢产物除具有炎性介质作用外,还参与调节多种细胞的生长增殖,表明了PLA2与细胞增殖存在一定关系。但cPLA2在细胞增殖的具体途径中的确切作用却仍不明确。 为进一步探讨cPLA2细胞增殖过程中的作用,我们通过改变cPLA2的活性或表达,观察在EGF和FBS两种不同的促增殖物质的作用下,Hela细胞的增殖情况及其细胞周期的改变情况。具体方法如下: 1.首先,利用不同浓度的MEK1/2特异性抑制剂U0126抑制ERK1/2,观察U0126对EGF和FBS作用下Hela细胞活性的变化及细胞周期的影响。结果发现,EGF和FBS均可引起Hela细胞明显增殖,且二者诱导增殖的效果无明显差异;而U0126可以明显抑制二者诱导的细胞增殖,且呈剂量依赖性;同时它也能减少Hela细胞G2/M期比例,将细胞阻滞在S期;我们还发现EGF和FBS可促使Hela细胞中cPLA2活性明显增加,EGF对cPLA2活性上调的效果略高于FBS处理组;而U0126的加入可以将二者对cPLA2活性上调的作用抑制。其次,利用不同浓度的cPLA2特异性抑制剂AACOCF3抑制cPLA2活性,在EGF和
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