论文摘要
在耐辐射球菌基因组中有两个基因分别编码DNA连接酶,一个是NAD+依赖型DNA连接酶（LigA）,一个是ATP依赖型DNA连接酶（LigB）。本文对其进行了生物信息学,突变和生化特性分析研究。结果如下: 1.系统进化和保守区域局部联配表明DRLigA在NAD+依赖型DNA连接酶中与Thermus连接酶非常接近,而DRLigB与其它ATP依赖型DNA连接酶关系很远,除了Nitrosomonas europaea（NE1884,真核DNA连接酶Ⅲ的类似同源物）。 2.对DRB0100和DR2069进行了定向突变。DRB0100为纯合子突变,DR2069为持续的杂合子突变。因而,DRB0100是个非必需基因,DR2069是必需的。 3.在大肠杆菌中表达出两者的重组酶,均一性纯化后进行了生化鉴定。两种DNA连接酶的最佳反应温度和pH值分别为60℃和7.0。它们的最佳MgCl2浓度为5mM。各自的100℃热失活的半活性期大约为3分钟和5分钟。此外,DRLigB比DRLigA在粘性和平末端DNA的连接上表现出更高的活性。
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