胶质细胞活化的研究——actin结合蛋白在活化胶质细胞的特异性表达

论文题目: 胶质细胞活化的研究——actin结合蛋白在活化胶质细胞的特异性表达

论文类型: 博士论文

论文专业: 神经生物学

作者: 董静慧

导师: 周长福

关键词: 去传入海马,结合蛋白,胶质细胞活化

文献来源: 中国科学院研究生院（上海生命科学研究院）

发表年度: 2005

论文摘要: 切断内嗅皮层到海马的神经传入会引起损伤纤维在海马投射区的顺行性变性。轴突变性使海马去神经靶区的胶质细胞发生强烈的反应性激活,表现在胶质细胞形态的迅速改变,迁移和增殖能力的增强,活跃的吞噬活性以及细胞因子的分泌能力。活化胶质细胞运动性的增强依赖于由actin构成的细胞骨架的快速装配,而actin结合蛋白已被证明是细胞骨架组装过程关键的调节因子。本实验报道了actin结合蛋白profilin、gelsolin和thymosinβ4在鼠科动物去内嗅皮层传入海马的表达和分布。Northern杂交分析显示三个基因的转录都在损伤后1天显著增加,损伤后3天达到表达的最高水平,并几乎都在损伤后2周左右恢复到正常对照的水平。原位杂交进一步证实了他们在小鼠海马去神经支配靶区瞬时性的表达改变。免疫组织化学反应显示gelsolin蛋白也在去神经损伤后瞬时性上调,并且与该基因的转录上调具有相同的时空特性。这三个actin结合蛋白的上调表达都特定发生在海马去内嗅皮层传入靶区,即海马的腔隙分子层和齿回的外分子层,这一区域也被证明是活化胶质细胞吞噬作用最为活跃的区域。原位杂交与IB4 lectin(小胶质细胞标记物)组织

论文目录:

一、引言

二、材料和方法

2.1 动物模型

2.1.1 去内嗅皮层传入手术

2.1.2 胆碱酯酶组织化学

2.2 Northern Blot

2.2.1 异硫酸氰胍一步法从海马组织分离总RNA

2.2.2 RNA 甲醛变性凝胶电泳

2.2.3 Northern Blot

2.3 亚克隆质粒的建立

2.3.1 亚克隆质粒

2.3.2 质粒抽提与模板纯化

2.4 原位杂交

2.4.1 体外转录合成原位杂交探针

2.4.2 原位杂交探针水解

2.4.3 原位杂交

2.5 免疫组织化学

2.6 免疫荧光双标

2.7 Lectin 组织化学

三、结果和讨论

3.1 去内嗅皮层传入诱发profilin mRNA 表达于海马活化的小胶质细胞--

3.2 去神经损伤诱发活化的胶质细胞表达gelsolin 基因和蛋白

3.3 Thymosin β4(Tβ4)基因在海马去神经靶区表达上调

3.4 关于profilin、gelsolin 和Tβ4 表达异同的讨论

总结

参考文献

发表文章目录

会议摘要

综述:胶质细胞的活化及其功能

引言

1. 胶质细胞活化特性

1.1 小胶质细胞的活化

1.2 星型胶质细胞的活化

2. 胶质细胞活化的调节

2.1 小胶质细胞活化的调节

2.2 星型胶质细胞活化的调节

3. 活化胶质细胞的功能

3.1 吞噬功能

3.2 分泌细胞外基质影响层特异性发芽

3.3 分泌生长因子

4. 小结

参考文献

缩写

致谢

发布时间: 2006-08-29

参考文献

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