饱和脂肪酸导致骨骼肌胰岛素抵抗及收缩促进GLUT4转位的机制研究

饱和脂肪酸导致骨骼肌胰岛素抵抗及收缩促进GLUT4转位的机制研究

论文摘要

目的:探讨饱和脂肪酸对骨骼肌细胞胰岛素作用的影响及收缩促进GLUT4转位的机制。方法:第一部分用棕榈酸孵育L6-GLUT4myc和C2C12-GLUT4myc骨骼肌细胞,酶联免疫吸附法(enzyme-linked immnosorbent assay, ELISA)测定棕榈酸对骨骼肌细胞GLUT4myc转位的影响。应用免疫印迹法(Western blot)检测棕榈酸对Akt磷酸化的影响。第二部分在上述工作基础上,Western blot检测棕榈酸对c-JunN-末端激酶(JNK)、IRS1的磷酸化的影响和BIM(cPKC和nPKC的抑制剂)对棕榈酸孵育后Akt的磷酸化影响并同时用ELISA法检测对GLUT4myc转位的影响。第三部分在上述基础上电刺激(Electric Pulse Stimulation,EPS) C2C12-GLUT4myc骨骼肌细胞,测定电刺激对GLUT4myc转位的影响、并检测Compound C (AMPK的抑制剂,CC)、STO-609(CaMKK的抑制剂)、KN93(CaMKⅡ的抑制剂)、CN21(CaMK Ⅱ的抑制肽)对电刺激调节GLUT4myc转位的影响。结果:第一部分结果显示:饱和脂肪酸降低了胰岛素刺激的L6-GLUT4myc和C2C12-GLUT4myc肌管的GLUT4myc转位和Akt的磷酸化。第二部分结果显示:饱和脂肪酸并不影响JNK、IRS1的磷酸化;PKC抑制剂BIM对饱和脂肪酸孵育后胰岛素刺激的GLUT4myc转位的降低没有影响,即抑制PKC没有缓解胰岛素抵抗作用。第三部分结果显示:电刺激增加了C2C12-GLUT4myc肌管的GLUT4myc转位;Compound C、STO-609、KN93、CN21均抑制了电刺激增加的GLUT4myc转位。结论:1.饱和脂肪酸造成L6-GLUT4myc和C2C12-GLUT4myc骨骼肌细胞胰岛素抵抗。2.饱和脂肪酸造成骨骼肌细胞胰岛素抵抗其机制可能不涉及PKC、JNK或参与作用很小。3.电刺激可以模拟运动促进GLUT4myc转位;参与的信号分子可能涉及AMPK、CaMKK、CaMKⅡ。

论文目录

  • 中文摘要
  • Abstract
  • 符号说明
  • 前言
  • 研究现状、成果
  • 研究目的、方法
  • 一、棕榈酸对骨骼肌细胞胰岛素作用的影响
  • 1.1 材料
  • 1.2 方法
  • 1.3 结果
  • 1.4 小结
  • 二、棕榈酸造成骨骼肌细胞胰岛素抵抗的机制
  • 2.1 材料
  • 2.2 方法
  • 2.3 结果
  • 2.4 小结
  • 三、电刺激调节C2C12-GLUT4myc骨骼肌细胞GLUT4myc转位及其机制
  • 3.1 材料
  • 3.2 方法
  • 3.3 结果
  • 3.4 小结
  • 讨论
  • 结论
  • 参考文献
  • 发表论文和参加科研情况说明
  • 综述 饱和脂肪酸与骨骼肌胰岛素抵抗
  • 综述参考文献
  • 致谢
  • 相关论文文献

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