晚香玉组培再生体系建立及其60Co-γ射线辐射效应研究

论文摘要

晚香玉（Polianthes tuberosa.L）为石蒜科晚香玉属多年生宿根草本植物,是重要的切花之一。目前在生产上仅有单瓣和重瓣两个品种供商业化栽培,呈现出品种单一、花色单一,自然结实率低、常规生产周期较长等状况,急需通过辐射诱变技术产生变异品系创造新品种或通过组织培养技术获得大量试管苗满足市场需求。因此,组织培养及辐射诱变技术对提高晚香玉质量、降低生产成本及诱发产生新品种等方面都具有重要的意义。但对于这两个品种的叶片再生体系的研究及辐射诱变处理后的同功酶分析尚未见报道。本研究在对目前被广泛接受的晚香玉单、重瓣两个品种进行再生体系建立并对60Co-γ射线辐照处理后的单、重瓣种球进行农艺性状及同功酶分析,以期对高效的再生体系建立及分子方面的研究打下基础。并期望通过60Co-γ射线辐照处理筛选出优良的新品种,通过建立的组织培养体系达到扩繁的目的。整个试验结果如下:1.以晚香玉单、重瓣两个品种叶片为材料,通过设定4种不同的0.1 % HgCl2消毒时间,筛选出叶片的最佳消毒方法为0.1%HgCl2浸泡2 min.2.诱导愈伤组织形成和愈伤组织分化阶段,对6-BA和NAA设置浓度梯度,采用完全组合设计,得出诱导单瓣叶片愈伤形成的较适培养基为:MS+6-BA2.0 mg/L+NAA1.0 mg/L;重瓣叶片愈伤形成的较适培养基为:MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.5 mg/L.单瓣愈伤分化的较适培养基为:MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.5 mg/L;重瓣愈伤组织的较适培养基为:MS+6-BA0.5 mg/L+NAA0.2 mg/L.3.在生根阶段,设定两种培养基种类及6-BA、NAA、KT各三种浓度梯度,采用4因素3水平正交设计,得出诱导单、重瓣生根的较适培养基为:1/2MS+KT0.2 mg/L+NAA0.5 mg/L+6-BA0.2 mg/L.4.用不同剂量（15 Gy、20 Gy、25 Gy、30 Gy、35 Gy）60Co-γ射线辐照处理晚香玉单、重瓣两品种种球,在农艺性状上主要表现为出苗率降低,植株变矮,开花延迟,花期延长,说明辐射处理对植株的生长有显著影响。15 Gy、20 Gy处理组的植株辐射损伤较小,长势相对较好,两品种间单瓣的耐辐射能力较重瓣强,说明低剂量的的辐射处理对植株的生长有促进作用,品种之间的辐射效应存在差异性。5.得出单、重瓣两个品种的各农艺性状和辐照剂量之间的关系方程为:单瓣出苗率与剂量相关方程:y=-0.1741x+10.126 R2=0.8424重瓣出苗率与剂量相关方程:y=-0.1935x+9.8649 R2=0.9785单瓣叶长与剂量相关方程:y=-0.6177x+31.488 R2=0.7955重瓣叶长与剂量相关方程:y=-0.6168x+31.064 R2=0.7828单瓣花葶高与剂量相关方程:y=-2.6527x+101.61 R2=0.7756重瓣花葶高与剂量相关方程:y=-2.4445x+99.754 R2=0.8113单瓣着花率与剂量相关方程:y=-0.2616x+9.1171 R2=0.7328重瓣着花率与剂量相关方程:y=-0.2508x+8.5586 R2=0.7656单瓣花期与剂量相关方程:y=-2.8573x+100.03 R2=0.881重瓣花期与剂量相关方程:y=-2.9081x+98.919 R2=0.9121得出单瓣品种LD50=20Gy,重瓣品种的半致死剂量有待进一步实验。6.运用聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）方法对不同辐照剂量下的两个品种的植株叶片进行同工酶分析,过氧化物酶同工酶在20 Gy和25 Gy处为四条带,对照及其他辐射剂量下为三条带;酯酶同工酶基本均为三条带;过氧化氢酶同工酶均为六条带,重瓣品种的三种同工酶酶带均较单瓣品种宽且颜色较深,随着辐射剂量的增加,两品种同功酶酶谱均有依次加宽颜色加深的趋势。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 文献综述
• 1.1 晚香玉简介
• 1.2 观赏植物组织培养技术现状及其应用
• 1.3 观赏植物组织培养的基本过程
• 1.4 观赏植物辐射诱变育种的发展
• 1.4.1 辐射诱变育种在全球的发展
• 1.4.2 我国在辐射诱变育种上的成就
• 1.4.3 观赏植物辐射诱变育种的发展前景
• 1.5 研究辐射诱变育种的方法
• 1.5.1 农艺性状观察法
• 1.5.2 同工酶分析鉴定法
• 1.6 晚香玉研究进展
• 1.7 其他球茎类观赏植物研究进展
• 2 引言
• 2.1 研究目的和意义
• 2.2 研究内容
• 2.2.1 组织培养研究内容
• 60Co-γ射线辐射效应研究'>2.2.2⁶⁰Co-γ射线辐射效应研究
• 3 材料与方法
• 3.1 材料
• 3.1.1 组织培养材料
• 3.1.2 辐射诱变材料
• 3.2 主要仪器设备
• 3.3 主要药品试剂
• 3.4 方法
• 3.4.1 外植体消毒
• 3.4.2 愈伤组织诱导
• 3.4.3 分化培养
• 3.4.4 生根培养
• 3.4.5 炼苗移栽
• 3.4.6 2 个品种辐射处理后农艺性状的观察
• 3.4.7 同工酶分析
• 3.4.7.1 试剂的配制
• 3.4.7.2 样品处理
• 3.4.7.3 凝胶制备
• 3.4.7.4 酶液提取
• 3.4.7.5 加样
• 3.4.7.6 电泳
• 3.4.7.7 染色
• 4 结果与分析
• 4.1 外植体消毒方法的筛选
• 4.2 2 个品种愈伤组织诱导效果的对比性试验
• 4.3 不同浓度的6-BA和NAA对2个品种愈伤组织诱导分化的影响
• 4.4 不同培养基对2个品种试管苗生根的影响及其对比性研究
• 4.5 炼苗移栽
• 4.6 2 个品种辐射处理后形态学结果
• 4.6.1 不同辐射剂量对出苗率的影响
• 4.6.2 不同辐射剂量对植株生长的影响
• 4.6.3 不同辐射剂量对植株开花的影响
• 4.6.4 辐射剂量与各农艺性状的相关性分析
• 4.7 同工酶活性分析
• 5 结论与讨论
• 5.1 结论
• 5.1.1 6-BA 和NAA 对晚香玉两个品种再生体系建立的影响
• 60Co-γ射线辐射处理对植株农艺性状的影响'>5.1.2⁶⁰Co-γ射线辐射处理对植株农艺性状的影响
• 60Co-γ射线辐射处理对植株同工酶的影响'>5.1.3⁶⁰Co-γ射线辐射处理对植株同工酶的影响
• 5.2 讨论
• 5.2.1 对于晚香玉外植体的选择
• 5.2.2 对于晚香玉组织培养激素的选择
• 5.2.3 对于晚香玉辐射诱变处理时剂量与剂量率的确定
• 5.2.4 对于晚香玉同工酶的研究
• 5.2.5 对于辐射诱变筛选新品种的展望
• 附图
• 参考文献
• 个人简介
• 在读期间发表的论文
• 致谢