氯霉素胶体金试纸条的研制

论文摘要

氯霉素是一种高效广谱抗生素,常用于治疗人体和动物的细菌性疾病,但是氯霉素残留对人体有较强的副作用,所以对于动物源性食品中的氯霉素残留的检测显得尤为重要。传统氯霉素残留分析不乏灵敏度高,准确性好的检测方法,但很难满足现场、快速的检测需求。故建立快速、高效的检测方法并制备出相应的产品是大势所趋。本研究为了提高胶体金试纸条的灵敏度和稳定性,对不同粒径的胶体金试纸条工艺、样品前处理方法进行了优化,具体研究内容如下：(1)胶体金试纸条工艺优化利用氯霉素胶体金免疫层析分析方法制备氯霉素胶体金试纸条,利用柠檬酸三钠法分别制备20、30、40nm胶体金,并分别优化三种胶体金试纸条的制备工艺条件。结果发现,用同样的方法标记三种胶体金标记氯霉素单克隆抗体效果没有明显差异,只是标记蛋白量略有不同；三种金标抗体纯化离心速度分别为10000、8000、8000r/min,粒径越小离心速度越大；三种粒径的胶体金可以共用试纸条材料,只是在硝酸纤维膜上抗原、羊抗鼠IgG最佳包被浓度略有不同。(2)试纸条性能测试20、30、40nm胶体金试纸条灵敏度依次为7、3、9 ng/mL；与青霉素、庆大霉素、链霉素、四环素的交叉反应均大于200ng/mL；干燥保存2个月；30nm的胶体金制备的胶体金试纸条在稳定性、灵敏度方面都明显优于20nm和40nm。(3)实际样品检测利用30nm胶体金生产氯霉素胶体金试纸条,并对实际样品进行检测,成品试纸条检测结果稳定、可靠。与传统样品前处理方法相比,固相萃取技术不但能较好的从样品中提取目标物,且达到富集的目的,从另一个角度提高检测方法的灵敏度。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第1章 引言
• 1.1 氯霉素简介
• 1.2 氯霉素在食品中的残留危害
• 1.3 氯霉素残留的检测方法现状
• 1.3.1 微生物法
• 1.3.2 色谱法
• 1.3.3 免疫检测法
• 1.4 胶体金免疫层析方法
• 1.4.1 胶体金免疫层析方法原理
• 1.5 选题意义
• 1.6 研究内容
• 1.7 创新点
• 第2章 氯霉素胶体金免疫层析试纸条的制备
• 2.1 材料与方法
• 2.1.1 材料与仪器
• 2.1.2 方法
• 2.2 结果与讨论
• 2.2.1 胶体金试纸条工艺优化
• 2.2.2 试纸条材料的选择与处理结果
• 2.3 本章小结
• 第三章 氯霉素胶体金免疫层析试纸条性能检测
• 3.1 材料与方法
• 3.1.1 材料
• 3.1.2 方法
• 3.2 结果与讨论
• 3.2.1 试纸条灵敏度结果
• 3.2.2 胶体金试纸条其他性能
• 3.2.3 ELISA检测结果
• 3.3 本章小结
• 第四章 试纸条的生产待测样品的前处理
• 4.1 材料与方法
• 4.1.1 试剂与仪器
• 4.1.2 方法
• 4.2 结果与讨论
• 4.2.1 试纸条的生产结果
• 4.2.2 样品提取方法的确定结果
• 4.2.3 与ELISA方法比较结果
• 4.2.4 讨论
• 第五章 结论与展望
• 5.1 结论
• 5.2 展望
• 致谢
• 参考文献
• 攻读学位期间的研究成果