论文摘要
【目的】探讨人类有机阴离子转运多肽超家族成员OATP-E mRNA在乳腺癌细胞株MCF-7和对阿霉素耐药的乳腺癌细胞株MCF-7/ADR中的表达;建立荧光定量RT-PCR检测肿瘤细胞OATP-E基因表达的方法并绘制出外标准曲线,为基础研究、临床治疗和药物筛选提供针对人类有机阴离子转运多肽超家族成员OATP-E方面研究的有效手段。 【材料与方法】 1.细胞培养:以含有10%胎牛血清的RPMI1640培养基常规培养乳腺癌细胞株MCF-7和对阿霉素耐药的乳腺癌细胞株MCF-7/ADR,传代待其生长稳定后分别提取细胞总RNA待用。 2.细胞总RNA的提取:用Trizol试剂分别提取乳腺癌细胞株MCF-7和对阿霉素耐药的乳腺癌细胞株MCF-7/ADR的细胞总RNA。 3.RT-PCR反应:以所提取的乳腺癌细胞株MCF-7的细胞总RNA为原料,逆转录反应获得编码人类有机阴离子转运多肽超家族成员OATP-E的cDNA并进行普通PCR扩增。 4.构建克隆载体pGEM-OATP-E标准重组质粒:提取并纯化PCR产物,与pGEM-T Easy Vector质粒载体相连接,构建克隆载体pGEM-OATP-E重组质粒并转化大肠杆菌菌株JM109感受态细胞。 5.外标准曲线的建立:采用蓝白斑染色方法筛选并提取pGEM-OATP-E重组质粒,并将该pGEM-OATP-E重组质粒定量后作为标准品,绘制实时荧光定量RT-PCR方法检测OATP-E mRNA的外标准曲线。 6.采用本实验建立的实时荧光定量RT-PCR方法及其外标准曲线检测OATP-E mRNA在对阿霉素耐药的乳腺癌细胞株MCF-7/ADR中的表
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- [2].溶酶体相关膜蛋白2AshRNA对乳腺癌细胞株紫杉醇耐药的影响[J]. 细胞与分子免疫学杂志 2014(04)
- [3].受体型蛋白酪氨酸磷酸酶O基因甲基化与乳腺癌细胞株化疗敏感性的关系[J]. 中华乳腺病杂志(电子版) 2014(05)
- [4].显性负性ⅠκBα对乳腺癌细胞株核因子κB通路和运动迁移的影响[J]. 中国病理生理杂志 2008(05)
- [5].早期乳腺癌的物理治疗[J]. 江苏医药 2019(04)
- [6].PAK4通过激活PI3K/AKT信号通路促进乳腺癌的增殖和转移[J]. 宁夏医学杂志 2019(06)
- [7].中医药治疗三阴性乳腺癌进展[J]. 浙江中西医结合杂志 2018(01)
- [8].14-3-3θ基因过表达载体的构建及其过表达乳腺癌细胞株的建立[J]. 现代生物医学进展 2015(15)
- [9].FGF4在乳腺癌组织中的表达变化及对乳腺癌细胞株增殖、迁移能力的调控作用[J]. 山东医药 2018(27)
- [10].雌激素受体阳性绝经后肥胖乳腺癌的芯片数据分析[J]. 广州医科大学学报 2018(03)
- [11].雷帕霉素和罗格列酮对人乳腺癌细胞生长的影响[J]. 中国肿瘤临床 2010(11)
- [12].促性腺激素释放激素类似物对乳腺癌细胞株化疗敏感性的影响[J]. 中国病理生理杂志 2008(05)
- [13].乳腺癌中AR的表达及其对不同乳腺癌细胞株的影响[J]. 临床与实验病理学杂志 2018(05)
- [14].Bcl-9基因敲除对乳腺癌细胞株侵袭及迁移能力作用研究[J]. 解放军医药杂志 2018(04)
- [15].多西他赛对三阴性乳腺癌细胞株增殖影响及其机制的探讨[J]. 中华肿瘤防治杂志 2012(23)
- [16].趋化因子受体CXCR7/RDC1在乳腺癌细胞株中的表达及意义[J]. 重庆医科大学学报 2009(10)
- [17].游离脂肪酸受体FFAR4/GPR120在乳腺癌组织中的表达及其临床意义[J]. 疑难病杂志 2019(09)
- [18].miR-21在辐射敏感性不同的3种乳腺癌细胞株中的表达差异及意义[J]. 中国妇幼保健 2013(09)
- [19].~(131)I-herceptin对乳腺癌细胞株的放射免疫治疗[J]. 江苏医药 2011(11)
- [20].乳腺癌细胞株两种原代培养方法的比较[J]. 江苏医药 2011(16)
- [21].曲古抑菌素A对乳腺癌细胞株MDA-MB-231增殖的影响[J]. 山东医药 2009(43)
- [22].miR-100抑制乳腺癌细胞迁移的作用和机制[J]. 现代肿瘤医学 2017(11)
- [23].乳腺癌细胞株MDA-MB-231获得性放疗抵抗机制探讨[J]. 中华肿瘤防治杂志 2014(23)
- [24].PRMT2剪接体在乳腺癌细胞株中的表达[J]. 中华疾病控制杂志 2015(05)
- [25].体外siRNA抑制乳腺癌细胞株端粒逆转录酶基因的表达[J]. 第四军医大学学报 2008(19)
- [26].姜黄素抑制乳腺癌细胞株Survivin表达及其增殖的影响[J]. 西部中医药 2017(07)
- [27].乳腺癌细胞株中MKK4的表达及其对细胞转移的影响和机理研究[J]. 现代生物医学进展 2011(20)
- [28].抑制SNCG阳性表达乳腺癌细胞株MDA-MB231的实验研究(英文)[J]. Chinese-German Journal of Clinical Oncology 2012(03)
- [29].表达MT1-MMP的乳腺癌细胞株对蒽环类药物敏感性研究[J]. 中国肿瘤临床与康复 2010(05)
- [30].敲除BLM基因的MDA-MB-231乳腺癌细胞株的构建[J]. 贵州医科大学学报 2018(05)
标签：有机阴离子转运多肽论文; 乳腺癌论文; 荧光定量论文; 重组质粒论文;