核桃楸青果皮生物活性及活性成分研究

论文摘要

本文研究了核桃楸青果皮95%乙醇提取物、石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取相杀虫活性;研究了它们对杨树烂皮病等3种林业病害的抑菌作用;考察了它们对大豆等3种植物化感作用;利用紫外-可见分光光度法,以胡桃醌和总黄酮为指标,考察了乙醇提取物的稳定性;利用GC-MS技术探索了乙酸乙酯和氯仿萃取相的化学组成、化学结构和相对含量。研究结果如下:（1）触杀活性试验采用药液浸虫法,胃毒活性试验采用叶片浸药饲虫法,各萃取相对舞毒蛾幼虫有显著的杀虫活性。乙醇提取物的杀虫活性强于氯仿、石油醚、乙酸乙酯萃取相,并且触杀作用比胃毒作用试虫死亡率高,药效快。（2）抑菌活性筛选采用滤纸片法,青果皮抑菌活性组分富集在石油醚和氯仿萃取相中,这两种萃取相对杨树烂皮病、樟子松枯梢病、杨树叶枯病这3种林业病害都有抑制作用;乙醇提取物对这3种菌种都没有抑制作用,并确定了不同萃取相对不同菌种的最低抑菌浓度。（3）化感活性测试采用滤纸培养皿法,通过测试确定石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取相对大豆、紫花苜蓿、白菜都有化感作用,氯仿、石油醚萃取相对大豆和紫花苜蓿的化感指数与浓度呈二次函数关系,各萃取相对白菜的萌发都有很强的抑制作用。活性测试为活性物质的提取和在农林方面的应用提供了科学依据。（4）以胡桃醌、总黄酮降解率作为指标,研究温度、pH值、光照三个因素对核桃楸青果皮乙醇提取物稳定性的影响。乙醇提取物随温度升高稳定性显著降低;pH值在4～8之间时,稳定性较好;温度升高或pH值变化时,核桃楸乙醇提取物中的胡桃醌、总黄酮降解具有一级反应的特征;光照使核桃楸乙醇提取物的稳定性降低。稳定性研究为确定核桃楸青果皮乙醇提取物保存条件提供理论依据。（5）用化学预试法、GC-MS技术探索了青果皮氯仿萃取相的化学成分。化学预试结果显示,氯仿萃取相中含有酚类、鞣质、有机酸、萘醌类物质、黄酮类物质、内酯、香豆素。氯仿萃取相TCL最佳展开剂为氯仿:甲醇=8:1,通过TLC分离和HPLC检测,进一步证明核桃楸青果皮氯仿中含有生物活性物质胡桃醌。利用GC-MS技术,从核桃楸青果皮氯仿萃取相中分离确认15种化合物,相对含量占氯仿萃取物的95.79%;含量最大的是5-羟基-1,4-萘醌,相对含量27.11%。利用GC-MS技术从乙酸乙酯萃取相中分离确认24种化合物,占乙酸乙酯萃取相总含量94.55%;含量最大的是5-羟基-1,4-萘醌,相对含量31.20%。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 绪论
• 1.1 引言
• 1.2 植物源农药研究进展
• 1.2.1 植物源农药主要类型和杀虫方式
• 1.2.2 植物源农药稳定性
• 1.3 化感作用
• 1.3.1 化感物质来源及影响化感物质产生因素
• 1.3.2 化感物质分类
• 1.4 核桃楸生物活性研究进展
• 1.4.1 核桃楸青果皮生物活性研究
• 1.4.2 核桃楸化学成分研究
• 2 核桃楸青果皮杀虫活性研究
• 2.1 供试材料
• 2.2 试验方法
• 2.2.1 供试药液制备
• 2.2.2 提取物杀虫活性测试
• 2.3 结果与讨论
• 2.3.1 乙醇提取物杀虫活性
• 2.3.2 氯仿萃取相杀虫活性
• 2.3.3 石油醚萃取相杀虫活性
• 2.3.4 乙酸乙酯萃取相杀虫活性
• 2.3.53 种萃取相杀虫活性比较
• 2.4 本章小结
• 3 核桃楸青果皮化感作用与抑菌活性研究
• 3.1 供试材料
• 3.2 试验方法
• 3.2.1 化感作用检测
• 3.2.2 抑菌活性与最低抑菌浓度检测
• 3.3 结果与讨论
• 3.3.1 氯仿萃取相化感作用
• 3.3.2 石油醚萃取相化感作用
• 3.3.3 乙酸乙酯萃取相化感作用
• 3.3.4 抑菌活性与最低抑菌浓度检测结果
• 3.4 本章小结
• 4 核桃楸青果皮提取物稳定性研究
• 4.1 供试材料与仪器
• 4.2 试验方法
• 4.2.1 乙醇提取物中胡桃醌和总黄酮含量测定
• 4.2.2 乙醇提取物中胡桃醌和总黄酮稳定性检测
• 4.2.3 温度对乙醇提取物中胡桃醌和总黄酮稳定性影响
• 4.2.4 pH对乙醇提取物中胡桃醌稳定性影响
• 4.2.5 光照对乙醇提取物中胡桃醌和总黄酮稳定性影响
• 4.3 结果与分析
• 4.3.1 胡桃醌和总黄酮标准曲线的绘制
• 4.3.2 温度对乙醇提取物中胡桃醌和总黄酮稳定性影响
• 4.3.3 pH值对乙醇提取物中胡桃醌稳定性影响
• 4.3.4 光照对乙醇提取物中胡桃醌和总黄酮稳定性影响
• 4.4 本章小结
• 5 核桃楸青果皮活性成分分析
• 5.1 供试材料与仪器
• 5.2 试验方法
• 5.2.1 氯仿萃取相薄层层析与柱层析分析
• 5.2.2 紫外和高效液相色谱分析
• 5.2.3 氯仿和乙酸乙酯相气谱—质谱分析
• 5.3 结果与分析
• 5.3.1 氯仿萃取相薄层层析与柱层析检测结果
• 5.3.2 紫外和高效液相色谱分析检测结果
• 5.3.3 化学成分预分析结果
• 5.3.4 氯仿和乙酸乙酯相气谱—质谱检测结果
• 5.4 本章小结
• 结论
• 参考文献
• 攻读学位期间发表的学术论文
• 致谢