MTHFR基因多态性及补充叶酸与非综合征性唇腭裂的相关性研究

论文摘要

目的：唇腭裂（Cleft Lip and Palate,CLP）是一种常见的先天性出生缺陷畸形,发病率高,居先天性疾病的第二位,其发病机制尚不明确。既往研究表明唇腭裂的发生与遗传因素及环境因素密切相关。到目前为止,相关环境因素及致病基因不断被发现,但其具体相关程度及致病机理仍不甚明确。相关致病基因主要有：TGFαTGFβ3、PVRL1、BCL3、IRF6、MTHFR、MSX1、PAX9、RARA等；相关环境因素主要有：物理损伤、化学因素、生物因素、胎儿内环境及孕妇个体因素等。以往研究发现叶酸在胚胎形成期的外胚层上颌突、球状突等融合过程中有着重要作用,叶酸代谢障碍与唇腭裂的形成密切相关。5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶（5,10-methylenetetrahydrofolate reductase, MTHFR）基因编码5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶,后者是叶酸代谢中的关键酶,它能催化5,10-亚甲基四氢叶酸使之还原为5-亚甲基四氢叶酸,成为叶酸在体内的主要活性形式,该基因突变导致酶变异,直接影响叶酸在体内代谢。研究表明该基因C677T位点多态性与非综合征性唇腭裂（NSCL/P）可能有关,但国内外众多研究结果存在较大差异,且结合孕期干预因素叶酸对NSCL/P的发病影响缺乏相关研究。本研究探讨①探讨河南地区汉族非综合征性唇腭裂患者MTHFR基因C677T位点多态性；②母孕期补充叶酸和家族史因素与非综合征性唇腭裂的发病关系：③MTHFR基因C677T位点基因型和补充叶酸对NSCL/P的联合致病性。材料与方法：选取2008年9月至2010年3月在郑州大学第一附属医院及郑州市第一人民医院整形外科就诊的非综合征性唇腭裂患者110例。①采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（polymerase chain reaction and restriction fragment length polymorphisms, PCR-RFLPs）方法检测110例患者外周血中MTHFR基因C677T位点基因型,与40例健康对照组比较等位基因频数差异,②进行病例-对照研究,将基因多态性与母孕期是否补充叶酸因素及其家族史进行统计学x2检验,并进行相关性分析了解MTHFR基因-环境之间是否存在交互致病作用。结果：1.病例组和对照组C677T基因型及等位基因频数比较,差异均具有显著性意义,（x2=9.55,P<0.01）,病例组TT基因型占20%,CT基因型占62.5%；对照组的TT基因型占15%,CT基因型占32.5%；病例组含T等位基因约51.36%,明显高于对照组的31.25%,是对照组的约1.64倍；2.病例组有家族史的患者TT基因型及T等位基因频数均高于无家族史患者（x2=10.93,P<0.05）,差异具有统计学意义；3.各类型唇腭裂的C677T基因型及等位基因频数与对照组比较：唇裂组和对照组比较x2=4.802,P=0.028<0.05,有统计学意义；腭裂组和对照组比较x2=9.068,P<0.05,有统计学意义；唇裂合并腭裂患者组和对照组比较x2=6.927,P<0.05,有统计学意义；4.病例组和对照组母孕期是否补充叶酸比较,未补充叶酸组的NSCL/P发病率为80.25%,补充叶酸组的NSCL/P发病率为65.22%,高出约1.23倍,x2=4.304,P<0.05,y=-0.169,呈负性相关；5.以CC基因型+未补充叶酸为参照,CT和TT基因型与叶酸缺乏有交互致病作用（P<0.05）,患NSCL/P的发病风险分别为CC基因型且未补充叶酸的10.200倍（95%CI：1.612～64.556）和8.500倍（95%CI：0.971～74.424）。结论：1.MTHFR基因C677T位点突变与河南汉族人群非综合征性唇腭裂的发生相关,突变等位基因T能增加NSCL/P的患病风险；2.母孕期补充叶酸能明显降低非综合征性唇腭裂的发生风险；3.非综合征性唇腭裂家族史对其发病有一定相关性；唇裂、腭裂及唇裂合并腭裂均与MTHFR基因C677T位点突变相关；4.CT和TT基因型与孕期叶酸缺乏有交互致病作用。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 中英文缩略词对照表
• 前言
• 材料
• 方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述 叶酸与先天畸形
• 参考文献
• 附录 河南省唇腭裂发生相关因素调查问卷
• 个人简历
• 硕士在读期间发表文章
• 致谢