论文摘要
本试验进行了L-精氦酸产生菌诱变选育的研究。 试验考察了三种出发菌株——LH谷氨酸棒杆菌(LH Glutamicum corynebacterium)、谷氮酸棒杆菌1.495(Glutamicum corynebacterium 1.495)和钝齿棒杆菌1.542(Corynebacterium crenatum 1.542)的性质,包括出发菌株本底精氨酸产量,对L-精氨酸结构类似物D-精氨酸(D-Arg)、磺胺胍(SG)的敏感性以及亚硝基胍(NTG)对它们的致死率三个方面,以确定作为诱变育种的最适出发菌株。结果显示LH谷氨酸棒杆菌作为出发菌株对进行下一步的试验最为有利。 第二部分进行了LH谷氨酸棒杆菌诱变及筛选的研究。用适当浓度的亚硝基胍对LH谷氨酸棒杆菌进行诱变,在含磺胺胍的基本培养基平板上筛选出所有具磺胺胍抗性的菌株。将所有菌株分离纯化后做摇瓶发酵,测定各个菌株发酵液精氨酸的含量。第一轮的诱变选育结果是在抗0.2%和0.4%磺胺胍的99个株菌中发现一个精氨酸产量较高的菌株414。414菌株5代接传,使其生理性状稳定以后同出发菌株相比较,精氨酸产量提高3.7倍。第二轮诱变以414菌株作为出发菌株,用含磺胺胍0.6%的基本培养基进行筛选,最后得到两个精氨酸产量提高的菌株610、612。摇瓶发酵,测定精氨酸产量同414菌株相比较,精氨酸产量分别提高93.8%和87.8%,且传代稳定性也比较好。
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