氯嘧磺隆高效降解菌的分离、鉴定及其降解特性研究

论文摘要

本文针对氯嘧磺隆的残留药害问题,从土壤中驯化富集筛选出氯嘧磺隆的高效降解菌,研究了其降解特性。从氯嘧磺隆驯化的土壤中分离大豆田除草剂氯嘧磺隆的高效降解细菌2株,这2株菌可以利用氯嘧磺隆为唯一碳源进行生长,其在4 d内对10mg/L氯嘧磺隆的降解率分别为80%和86%,实验室命名为B1和B2。通过生理生化特征和16SrDNA序列分析,菌株B1被鉴定为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）,16SrDNA序列测序结果表明,该菌株的16SrDNA片段为1511 bp,G+C含量为55.13%,在GenBank中的登录序号为DQ401073.1;菌株B2被鉴定为苍白杆菌（Ochrobactrum anthropi）,16SrDNA片段为1490bp,G+C含量为54.97%,在GenBank中的登录序号为AM114410。研究其降解氯嘧磺隆机理,选菌株B1的最适生长温度为35～37℃,pH6～7,最适培养基装液量为50 ml/250 mL。在37℃,无机盐培养基中120 r/min振摇96 h,其对10mg/L氯嘧磺隆的降解率达80%;菌株B2的最适生长温度为35～37℃,pH6～7,最适培养基装液量为50 ml/250 mL。在37℃,无机盐培养基中120 r/min振摇96 h,其对10mg/L氯嘧磺隆的降解率达86%。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 绪论
• 1.1 磺酰脲类除草剂的应用
• 1.1.1 磺酰脲类除草剂的作用方式
• 1.1.2 磺酰脲类除草剂的选择性
• 1.1.3 磺酰脲类除草剂的环境行为
• 1.2 磺酰脲类除草剂的残留药害问题
• 1.3 磺酰脲类除草剂残留测定方法研究
• 1.3.1 化学分析测定方法
• 1.3.2 酶联免疫法
• 1.3.3 生物技术测定方法（Bioassay）
• 1.4 磺酰脲类除草剂的微生物降解
• 1.5 氯嘧磺隆的特性及其生物降解研究进展
• 1.5.1 氯嘧磺隆的物理化学特性
• 1.5.2 氯嘧磺隆的作用机制
• 1.5.3 氯嘧磺隆的应用现状及存在问题
• 1.5.4 氯嘧磺隆的残留分析研究进展
• 1.5.5 微生物降解氯嘧磺隆的研究现状
• 1.6 研究目的和意义
• 2 氯嘧磺隆高效降解菌的分离及分类鉴定
• 2.1 材料、试剂及仪器设备
• 2.1.1 供试土壤
• 2.1.2 供试植物材料（作物）
• 2.1.3 试验药剂
• 2.1.4 工具酶和试剂
• 2.1.5 仪器
• 2.1.6 试剂配制
• 2.2 方法
• 2.2.1 氯嘧磺隆降解菌的富集与筛选
• 2.2.2 氯嘧磺隆测定方法
• 2.2.3 降解试验方法
• 2.2.4 菌种的分类鉴定
• 2.2.5 16SrDNA 基因的制备
• 2.2.6 16SrDNA 基因的克隆
• 2.2.7 重组质粒的核苷酸序列测定
• 2.3 结果
• 2.3.1 氯嘧磺隆测定方法
• 2.3.2 氯嘧磺隆降解菌筛选结果
• 2.3.3 菌种鉴定
• 2.3.4 16SrDNA 基因的序列测定结果及系统发育分析
• 2.4 讨论
• 2.5 小结
• 3 氯嘧磺隆降解菌的特性研究
• 3.1 材料、试剂及仪器设备
• 3.1.1 供试土壤
• 3.1.2 供试植物材料（作物）
• 3.1.3 试验药剂
• 3.1.4 仪器
• 3.1.5 培养基配方
• 3.2 方法
• 3.2.1 氯嘧磺隆高效降解菌的最佳培养条件
• 3.3 结果
• 3.3.1 温度对氯嘧磺隆高效降解细菌生长的影响
• 3.3.2 pH 值对氯嘧磺隆高效降解细菌生长的影响
• 3.3.3 通气量对氯嘧磺隆高效降解细菌生长的影响
• 3.3.4 最优条件下氯嘧磺隆高效降解菌生长曲线及降解效率测定
• 3.4 讨论
• 3.5 小结
• 结论
• 参考文献
• 攻读学位期间发表的学术论文
• 致谢