鼓室内注射庆大霉素的内耳细胞生物学效应的实验研究

论文题目: 鼓室内注射庆大霉素的内耳细胞生物学效应的实验研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 耳鼻咽喉科学

作者: 刘建平

导师: 王正敏,戴春富,张天宇

关键词: 庆大霉素,毛细胞,内耳,耳毒性,体外培养,基底膜

文献来源: 复旦大学

发表年度: 2005

论文摘要: 第一部分:鼓室内注射庆大霉素在内耳的分布一、鼓室内庆大霉素一次注射在内耳细胞的分布目的:将庆大霉素同Texas Red连接形成gentamicin-conjugated Texas Red,即GTTR后,行豚鼠鼓室内注射GTTR,观察其在内耳的分布,比较一次鼓室内注射GTTR后,不同时间庆大霉素在前庭和耳蜗的分布情况。方法:研究对象为豚鼠,行鼓室内GTTR注射一次,在注射后12h、24h、48h、3d、4d、7d、14d、28d处死动物,Phalloidin染色后运用激光共聚焦扫描显微镜观察基底膜、椭圆囊、球囊、外半规管壶腹嵴、血管纹庆大霉素分布情况,并进行荧光分布半定量分析。结果:庆大霉素早期在内耳所有细胞均见分布,在基底膜的外毛细胞、椭圆囊、球囊、外半规管壶腹嵴的感觉细胞聚集明显,主要聚集在毛细胞顶端纤毛下方的细胞浆中,支持细胞分布较少。在注射后第3天庆大霉素在内耳聚集达到最高峰,并在细胞内聚集较长时间,对临床治疗有指导意义。结论:GTTR是一个研究庆大霉素在内耳分布的良好的荧光探针,可用来检测庆大霉素的药代动力学和聚集机制。二、不同方案鼓室内庆大霉素注射在内耳各细胞的分布的比较目的:观察和比较豚鼠不同方案鼓室内注射GTTR后,庆大霉素在前庭和耳蜗的分布情况。方法:A组鼓室内注射GTTR一次,14天后观察,B组鼓室内注射GTTR一次,28天后观察;C组鼓室内注射GTTR每天一次,连续四天,第一次注射后28天后观察;D组鼓室内注射GTTR每周一次,连续四周,第一次注射后28天后观察,Phalloidin染色后运用激光共聚焦扫描显微镜进行基底膜、椭圆囊、球囊、外半规管壶腹嵴扫描,观察GTTR荧光分布情况,并进行荧光半定量分析,比较各组荧光分布的差异。结果:一次注射后,GTTR在注射后14天和28天在外毛细胞和、椭圆囊、球囊、外半规管壶腹嵴仍有较明显的聚集。每天一次,连续四天与每周一次,连续四周有非常明显的GTTR聚集。聚集主要在耳蜗的外毛细胞和前庭的感觉细胞。而在支持细胞未见明显累积。结论:庆大霉素鼓室内注射后,在内耳聚集的时间较长,反复注射有累积效

论文目录:

缩略词表

中文摘要

英文摘要

前言

第一部分鼓室内庆大霉素注射在内耳细胞的分布

一鼓室内庆大霉素一次注射在内耳细胞分布的比较

前言

材料和方法

结果

讨论

附图

二不同方案鼓室内庆大霉素注射在内耳细胞的分布

前言

材料和方法

结果

讨论

附图

第二部分不同方案鼓室内庆大霉素注射对内耳细胞的影响

前言

材料和方法

结果

讨论

附图

第三部分小鼠基底膜体外培养庆大霉素的吸收

前言

材料和方法

结果

讨论

附图

第四部分 TRPV1在内耳的表达和庆大霉素聚集的相关性研究

前言

材料和方法

结果

讨论

附图

参考文献

综述

致谢

论文独创性声明

论文使用授权声明

发布时间: 2005-09-19

参考文献

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