论文摘要
背景：木糖醇具有天然廉价、改善糖代谢、促进胰岛素分泌等作用，广泛用于糖尿病食品中。研究表明，应用外源性木糖醇可引起血尿酸水平升高而导致肾损害或原有肾脏病变加重。糖尿病肾病的主要病理特点是肾脏体积增大，肾小球、肾小管基底膜增厚及细胞外基质积聚，导致弥漫性和／或结节性肾小球硬化，合并肾小管间质纤维化，从而出现蛋白尿、高血压、肾功能衰竭等。Ⅳ型胶原是肾小球基底膜和细胞外基质的主要成分，其在肾组织的积聚是糖尿病肾病的病理基础。Ⅳ型胶原的表达可反映糖尿病肾病的程度。本实验采用对单次静脉注射链脲佐菌素诱发的糖尿病大鼠模型，喂饲以不同比例的木糖醇，观察其血清、尿中尿酸水平及肾脏Ⅳ型胶原表达的变化，探讨不同剂量木糖醇对糖尿病大鼠尿酸代谢和糖尿病肾病的作用。目的：探讨不同剂量木糖醇对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠尿酸代谢和肾小球Ⅳ型胶原表达的影响。方法：1．反相高效液相法（RP-HPLC）同时检测血清、尿液中尿囊素、尿酸和肌酐方法的建立及评价。2．雄性Wistar大鼠100只，随机选取16只作为正常对照组（NC组），余84只大鼠作为糖尿病组。糖尿病组大鼠一次性尾静脉注射链脲佐菌素（STZ）50 mg／kg建立糖尿病模型，72小时后血糖≥16.7mmol／L为造模成功，选取80只成模大鼠，平均分为4组：糖尿病对照组（DC组），糖尿病5％木糖醇饲料组（D+5％Xy组），糖尿病10％木糖醇饲料组（D+10％Xy组），糖尿病20％木糖醇饲料组（D+20％Xy组），NC组、DC组每天给予标准饲料，余3组分别给予加入不同比例木糖醇的标准饲料。分别于饲养第4周和第8周末，每组随机选取半数大鼠留24小时尿，采血，处死后取同侧肾脏行病理检查和免疫组化法测量肾小球Ⅳ型胶原表达。所有数据分析用SPSS统计软件完成。结果：1．RP-HPLC可同时检测尿囊素、尿酸、肌酐，三者浓度在5-1000μmol／L范围内与液相图峰面积具有良好的线性相关，r=0.999，日内和日间差异＜7％，回收率在96.1％-102.9％之间。2．体重和血糖的变化：4、8周糖尿病各组与同期NC组比较体重下降（P＜0.05），血糖升高（P＜0.05）；给予木糖醇的3个糖尿病组与同期DC组比较，体重均有所增加，血糖均有所下降，其中D+20％Xy组体重增加、血糖下降，有统计学意义（P＜0.05）。3．肾重指数的变化：4、8周后糖尿病各组与同期NC组比较，肾重指数均升高（P＜0.05）；D+20％Xy组与同期DC组比较肾重指数下降（P＜0.05）。4．尿酸、尿囊素的变化：糖尿病各组血清尿酸、尿囊素水平均较同期NC组升高（P＜0.05），尿液中尿酸水平较同期NC组下降；D+5％Xy、D+10％Xy组与同期DC组相比血清尿酸、尿囊素水平升高，其尿液中尿酸、尿尿囊素较同期DC组下降，但差别无统计学意义（P＞0.05）；D+20％Xy组血清尿酸、尿囊素水平较同期DC组下降（P＜0.05），尿液中尿酸、尿尿囊素较同期DC组升高（P＜0.05）。5．肌酐、肌酐清除率的变化：4、8周各组血尿肌酐、肌酐清除率差别无统计学意义（P＞0.05）。6．尿酸清除分数的比较：4、8周糖尿病各组与NC组相比下降（P＜0.05）；D+5％Xy、D+10％Xy组与DC组相比下降（P＜0.05）；D+20％Xy组与DC组相比升高（P＜0.05）。7．肾组织Col-Ⅳ的表达：4、8周糖尿病各组与同期NC组相比Col-Ⅳ呈高表达（P＜0.05）；D+5％Xy、D+10％Xy组与同期DC组相比Col-Ⅳ呈高表达（P＜0.05），D+20％Xy组则呈低表达（P＜0.05）；各组8周时与同组4周比较，均呈高表达（P＜0.05）。结论：1．RP-HPLC分析法实现了微量血清、尿样品中尿酸、尿囊素和肌酐的测定，且灵敏度高、重复性好、测定时间短，适用于科研工作和临床检测。2．STZ诱导的糖尿病大鼠模型具有典型的糖尿病临床特征，在自然病程的第4周即可出现明显的糖尿病肾病病理改变，适合作为糖尿病肾病的动物模型。3．糖尿病大鼠与正常大鼠相比嘌呤代谢产物尿酸和尿囊素的生成增多，排泄亦增多，但后者的程度不及前者，故其血尿酸水平升高。4．低、中剂量木糖醇糖尿病组与糖尿病对照组相比，尿酸和尿囊素的生成增加、排泄减少，使血尿酸和尿囊素水平进一步升高，肾组织Col-Ⅳ的积聚增加，糖尿病肾病加重。5．高剂量木糖醇糖尿病组与糖尿病对照组相比，尿酸排泄增加，大鼠血尿酸水平降低，肾组织Col-Ⅳ的积聚减少，糖尿病肾病有所缓解。
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