潍坊地区小鹅瘟流行现状调查和防制的研究

论文摘要

经过病料采集、病料处理和鹅胚尿囊腔接种试验,从山东潍坊的高密、诸城、临朐、昌乐等地分离到30株病毒。其中27株经琼脂扩散试验、鹅胚中和试验、小鹅瘟病毒分离株人工感染试验以及血凝试验被确定为小鹅瘟病毒。并对小鹅瘟病鹅群的所在地域、品种、日龄、数量、发病率、死亡率、发生月份、免疫方式、管理方式等相关情况进行了调查。调查统计结果表明:潍坊地区小鹅瘟主要发生于4～8月份,其中5～7月份出现的频率最高。它可使不同品种的鹅发病,其主要发病日龄为121日龄。而且发病鹅的发病日龄越小,死亡率越高。7日龄以内的雏鹅发病,其死亡率可超过90%。在30个疑似小鹅瘟的病鹅群中,有50%的病鹅群存在细菌感染,有26.7%的病鹅群存在病原性大肠杆菌的感染。由此可见,小鹅瘟和细菌病,尤其和大肠杆菌的混合感染已成为养鹅业中一个值得重视的问题。利用琼脂扩散试验测定了小鹅瘟病鹅群血清中的小鹅瘟病毒的抗体效价,为科学制定鹅的免疫程序提供依据。对人工感染试验中致病性较强的小鹅瘟病毒临朐分离株Ⅰ进行了EID50测定,测得结果为10-6.5,0.3ml。为进一步研究小鹅瘟病毒的毒力变化打下了基础。用分离到的27株小鹅瘟病毒分别接种8日龄易感小鹅,其发病率为100%,死亡率为50%～100%。小鹅瘟病毒临朐分离株Ⅰ具有良好的免疫原性,用它制备的的小鹅瘟油乳剂灭活苗安全有效。应用小鹅瘟病毒临朐分离株Ⅰ的高免卵黄抗体,预防小鹅瘟时,对小鹅的保护率达100%,治疗小鹅瘟时康复率可达91.7%。雏鹅发生小鹅瘟后,越早使用卵黄抗体,治疗效果越好。对临朐自然发病雏鹅的治疗试验表明:小鹅瘟病毒临朐分离株Ⅰ的卵黄抗体的治愈率比市售的卵黄抗体的治愈率提高了8%。这可能与免疫接种的油苗含有小鹅瘟病毒当地株有关。根据GenBank中小鹅瘟病毒VP3基因全序列,设计了一对特异性引物,预期扩增片段大小为375bp。提取病毒DNA进行PCR反应,成功扩增出375bp的特异条带。将PCR产物纯化后,与pMD18-T载体连接,连接产物转化大肠杆菌感受态细胞TG1,经AMP筛选和PCR鉴定后,对阳性克隆进行测序。测序结果表明该小鹅瘟病毒毒株的VP3基因序列与GenBank中已公布的鹅的GPV序列的同源性在95.4-99.9%之间。我们通过分析27个鹅场发生小鹅瘟的可能原因,制定了小鹅瘟综合性防制对策。在27个曾发生过小鹅瘟的鹅场推广使用。结果表明:试验鹅场采用综合防制对策后,发生小鹅瘟的次数显著减少,下降率为77.8%。所以控制小鹅瘟,应以综合防制措施为主。

论文目录

• 中文摘要
• 外文摘要
• 引言
• 1.小鹅瘟的流行历史概况
• 2.小鹅瘟病毒
• 3.小鹅瘟病鹅的组织学变化
• 4.小鹅瘟的诊断
• 5.小鹅瘟的混合感染
• 6.小鹅瘟疫苗
• 7.本研究的目的意义
• 试验一 潍坊地区小鹅瘟流行现状调查
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 试验二 潍坊地区小鹅瘟病毒寿光分离株ⅠVP3 基因扩增与分析
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 试验三 GPV 临朐分离株Ⅰ卵黄抗体的制备和应用
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 试验四 潍坊地区小鹅瘟综合性防控措施的研究
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 致谢