论文摘要
本研究在一年之内对两个不同的狐狸场舍内环境中气载内毒素和细菌气溶胶的含量进行了检测,同时对气载细菌内毒素和气载革兰氏阴性菌之间的相关性进行了分析;其次,对环境中气载需氧革兰氏阴性活菌菌群组成进行鉴定,并且对细菌气溶胶颗粒在Andersen-6采集器A-F6个层级上的分布进行分析,从而进一步分析狐狸舍内气载细菌对机体的呼吸系统健康的危害情况;然后通过对舍外及饲料粪便中内毒素及细菌含量的测定,对狐狸舍中气载内毒素及细菌气溶胶的来源进行了推断性分析;最后,对不同季节狐狸舍内环境中气载细菌和内毒素含量的变化进行了分析。本研究可分为四个部分:第一部分:狐狸舍内气载内毒素与细菌气溶胶的含量的测定本实验采用Andersen-6级空气微生物样品收集器,以5%公绵羊血-琼脂培养基为采样介质辅以革兰氏染色和API细菌快速鉴定系统确定狐狸舍内气载需氧、厌氧、兼性厌氧和革兰氏阴性活菌浓度;采用AGI-30空气微生物样品收集器,以50mlBET水为采样介质收集气载内毒素,并通过LAL试验确定狐狸舍内气载内毒素的含量。结果显示狐狸舍内空气中气载需氧活菌含量介于4.52×1022.87×104 CFU/m3之间,气载厌氧活菌含量介于3.50×1021.72×104CFU/m3之间,气载兼性厌氧活菌的浓度介于3.20×1021.53×104CFU/m3之间,气载需氧革兰氏阴性活菌含量介于4.07×1014.43×103CFU/m3之间,气载内毒素含量介于2.41×1012.09×103EU/m3之间。对两个不同狐狸场舍内气载内毒素含量与革兰氏阴性活菌之间的数量关系进行了统计分析,结果表明气载内毒素与气载需氧革兰氏阴性活菌浓度之间在数值上相关性不大(r1=0.54,r2=-0.262),相关系数r1、r2均不显著(P>0.05),进一步回归分析,回归方程不显著。因此,不管是通过革兰氏阴性活菌含量来指示狐狸舍环境中气载内毒素的含量,还是通过气载内毒素的含量来判断革兰氏阴性活菌含量都是不可靠的。第二部分:气载革兰氏阴性活菌的组成、含量及空气动力学分析本实验主要对狐狸舍内革兰氏阴性活菌含量及组成进行了鉴定。首先通过革兰氏染色,初步分离革兰氏阴性菌;其次,革兰氏阴性菌通过O-F试验和氧化酶实验分成肠杆菌科类和非发酵类革兰氏阴性菌,分别用API-20E和API-20NE进行鉴定,结果表明革兰氏阴性活菌占需氧活菌总数的8.43%16.61%;革兰氏阴性菌群主要包括肠杆菌科、巴氏杆菌属和假单胞菌属细菌,肠杆菌科细菌占优势,占总含量的83.2%89.4%,在肠杆菌科中大肠埃希氏菌浓度最高,假单胞菌属和巴氏杆菌属细菌占总含量的5.2%10.7%和5.4%6.1%,两个场舍均未检出厌氧革兰氏阴性活菌。狐狸场气载需氧活菌有33.8%,兼性厌氧活菌有37.8%,革兰氏阴性活菌约有24.6%分布在Andersen-6采样器的A层级上,这一级收集到的气溶胶颗粒,由于直径大,很少能进入人的鼻腔及呼吸道;气载需氧活菌有26.1%,兼性厌氧活菌有23.2%,革兰氏阴性活菌约有36.9%分布在C层级,它们能进入人、畜的气管、支气管,甚至细支气管。第三部分:狐狸舍内气载内毒素和需氧革兰氏阴性活菌来源的统计分析本实验对狐狸舍外空气及舍内饲料和粪便中内毒素、需氧活菌总数及革兰氏阴性活菌与舍内气载细菌和内毒素浓度之间的数量关系进行了统计分析。结果显示,舍内与舍外5m处气载需氧活菌、兼性厌氧活菌、需氧革兰氏阴性活菌和内毒素含量数值之间经过相关系数的显著性检验,相关性不显著(P>0.05),这说明狐狸舍内气载细菌和内毒素并不是来源于舍外,而是另有其它重要来源。对两个狐狸场舍内气载内毒素和需氧革兰氏阴性活菌浓度与饲料、粪便中内毒素和需氧革兰氏阴性活菌浓度进行相关性和回归分析。分析表明舍内空气中与饲料、粪便中需氧革兰氏阴性活菌浓度之间呈正相关(P<0.01和P<0.01;0.01<P<0.05和P>0.05),气载内毒素浓度与饲料、粪便中的有很大的相关性(0.01<P<0.05和P<0.01;P<0.01和P<0.01)。气载内毒素对饲料和粪便中内毒素浓度的回归方程均显著,而场2舍内的气载需氧革兰氏阴性活菌浓度与饲料粪便回归方程不显著。这表明粪便和饲料极有可能是舍内气载内毒素和需氧革兰氏阴性活菌的主要来源,但也不排除有其它原因。第四部分:不同季节狐狸舍内环境中气载细菌和内毒素含量的变化分析本实验对半封闭式和开放式两个狐狸场夏季、秋季、冬季三个季节的舍内气载内毒素和细菌气溶胶进行了检测,并且分析了其浓度的变化。结果显示,夏季舍内需氧革兰氏阴性活菌浓度为4.07×1013.47×103CFU/m3,内毒素浓度为2.67×1012.05×103EU/m3;秋季舍内需氧革兰氏阴性活菌浓度为4.07×1014.22×103CFU/m3,内毒素浓度为2.70×1012.09×103EU/m3;冬季舍内气载需氧活菌浓度为4.52×1022.58×104CFU/m3,需氧革兰氏阴性活菌浓度为4.58×1014.43×103CFU/m3 ,内毒素浓度2.40×1011.84×103EU/m3。气载需氧革兰氏阴性活菌基本趋势是夏季和秋季大于冬季,而气载内毒素变化不很明显,这说明狐狸舍内空气中细菌气溶胶的变化受到季节的影响,夏秋两季应当加强该季节舍内消毒及空气传播疾病的预防工作。