葡萄籽原花青素对肺癌SPC-A-1细胞放射增敏作用的实验研究

论文摘要

目的：研究葡萄籽原花青素对肺腺癌SPC-A-1细胞X射线放疗的增敏作用。方法：1.应用MTT法和集落形成法研究原花青素的放疗增敏效应,单因素方差分析确定增敏剂量和增敏作用,单击多靶曲线拟合计算增敏比及相关参数。2.流式细胞仪检测空白对照组（0Gy）,单独X射线照射组（1Gy,5Gy）和药物增敏X射线组（100μg·mL-1原花青素1Gy,5Gy）细胞周期变化与凋亡3.荧光定量PCR检测单独X射线照射组（1Gy）和不同浓度药物增敏组（50μg·mL-1,100μg·mL-1,1Gy）对细胞周期调控因子cyclin D1表达的影响。结果：1.MTT检测结果表明,单独应用原花青素对SPC-A-1的抑制作用较弱,IC50大于400 ug/ml;细胞药物处理后对X射线的敏感性增加,单因素方差分析表明药物和X射线有协同作用,50 ug/ml时表现出增敏效应；集落形成结果表明,100 ug/ml药物对X射线增敏作用明显,增敏比为2.56。2.流式细胞术检测发现试验组细胞出现了明显的凋亡峰提示亚二倍体DNA含量的细胞数量明显增加,细胞凋亡率（28.4%）显著高于单独照射组（14.9%）及空白对照组（5.3%）。处理组与相应对照组分别比较差异有非常显著性意义（p<0.01）。实验结果说明,原花青素可以诱导细胞凋亡,并将细胞阻滞于G1期。3.荧光定量PCR结果发现,原花青素50、100μg·mL-1作用于细胞48 h较对照组CyclinD1mRNA的表达分别下降0.189和0.426倍,表明原花青素可下调细胞CyclinD1mRNA的转录表达。结论：葡萄籽原花青素对肺腺癌SPC-A-1细胞有显著的放疗增敏作用。其机制可能是通过抑制细胞的增殖,G1期阻滞,诱导细胞凋亡,下调CyclinD1基因表达等而发挥抗肿瘤作用。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 缩略语
• 前言
• 第一部分 GSPE对SPC-A-1细胞生长的影响研究
• 第一节 MTT法检测GSPE对X射线增敏作用
• 1 材料与仪器
• 2 实验方法
• 3 结果与分析
• 4 讨论
• 第二节 集落形成法检测GSPE对X射线照射后细胞增殖的抑制作用
• 1 材料与仪器
• 2 实验方法
• 3 结果与分析
• 4 讨论
• 第二部分 流式细胞仪检测肿瘤细胞凋亡和细胞周期分布
• 1 材料与仪器
• 2 实验方法
• 3 结果与分析
• 4 讨论
• 第三部分 荧光定量PCR检测细胞周期调控因子cyclin D1的表达
• 1 研究目的
• 2 材料与仪器
• 3 实验方法
• 4 结果与分析
• 5 讨论
• 结论
• 展望
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 攻读硕士学位期间论文发表情况
• 攻读硕士学位期间科研情况
• 致谢