黑木耳多糖分离纯化、理化性质及抗疲劳功能的研究

论文摘要

黑木耳（Auricularia auricula）隶属于真菌门,担子菌纲,木耳目,木耳科,是我国重要的药食兼用真菌,其主要活性成分——黑木耳多糖具有调节人体免疫系统、降血压、降血脂、抗肿瘤、增强肠胃功能和护肝等功效。本文以黑木耳子实体为原料,利用现代分离分析手段,对黑木耳多糖的提取工艺、分离纯化、理化性质以及抗疲劳活性进行了研究,主要结果如下:1、分别对传统水提法、微波和超声辅助提取法提取多糖的工艺进行优化,并研究了微波和超声波对提取多糖的分子量分布的影响。在优化的最佳工艺条件下,传统水提法、微波和超声辅助提取法的一次提取得率分别为18%-19%、28%-29%和24%-25%,二次提取得率分别达22%-23%、33%-34%和30%-31%。微波和超声辅助提取法均能显著提高黑木耳多糖得率,促进大分子量组分溶出,但对小分子量组分的溶出会产生一定影响。2、精制多糖（AAP,经脱蛋白、脱色和透析处理）经DEAE Sephadex A-25离子交换层析和Sephadex G-200排阻层析分离纯化后,得到了三个主要组分,分别为AAPⅠ-a、AAPⅡ-a和AAPⅢ-a,经紫外扫描表明它们不含核酸和蛋白质,经凝胶柱层析和高效液相色谱鉴定均为单一组分。3、黑木耳多糖的主要组分AAPⅠ-a、AAPⅡ-a和AAPⅢ-a均为淡黄色絮状固体。经凝胶渗透色谱分析,它们的重均分子量（?）分别为1.37×104Dal、1.55×104Dal、8.68×105Dal,数均分子量（?）分别为1.26×104Dal、1.27×104Dal和4.12×104Dal。经高效液相色谱分析,AAPⅠ-a由葡萄糖组成;AAPⅡ-a由木糖和葡萄糖组成,摩尔比为1.33:1;AAPⅢ-a由木糖和葡萄糖组成,摩尔比为1:2.28。经红外光谱确定AAPⅠ-a和AAPⅡ-a为β-构型的吡喃糖,AAPⅢ-a为呋喃糖。4、AAP和AAPⅢ-a均能显著延长小鼠的力竭游泳时间;提高小鼠体内肝糖原和肌糖原的储备量和恢复率;降低小鼠运动后血乳酸的增长量,加速小鼠体内血乳酸的清除率;AAPⅢ-a能降低小鼠运动后血尿素氮的增长量,加速小鼠体内血尿素氮的清除率;AAPⅢ-a的效果优于AAP,以AAP-Ⅲ-a 100 mg/（kg·bw·d）效果最好。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 绪论
• 1.1 真菌多糖的研究概况
• 1.1.1 真菌多糖的提取和精制
• 1.1.2 真菌多糖的分离纯化
• 1.1.3 真菌多糖的结构分析
• 1.1.4 真菌多糖的生物活性
• 1.1.5 真菌多糖的构效关系
• 1.2 黑木耳的研究概况
• 1.2.1 黑木耳的主要化学成分
• 1.2.2 黑木耳的生物活性
• 1.2.3 黑木耳多糖的分离分析方法
• 1.3 研究内容和意义
• 2 黑木耳多糖提取工艺的研究
• 2.1 试验材料
• 2.1.1 原料
• 2.1.2 试剂
• 2.1.3 仪器
• 2.2 试验方法
• 2.2.1 原料预处理
• 2.2.2 黑木耳多糖提取的工艺流程
• 2.2.3 多糖含量测定方法
• 2.2.4 传统水提法提取黑木耳多糖
• 2.2.5 微波辅助法提取黑木耳多糖
• 2.2.6 超声辅助法提取黑木耳多糖
• 2.2.7 黑木耳多糖分子量分布的测定
• 2.2.8 数据分析
• 2.3 结果与讨论
• 2.3.1 多糖含量标准曲线的绘制
• 2.3.2 传统水提法提取黑木耳多糖的结果分析
• 2.3.3 微波辅助法提取黑木耳多糖的结果分析
• 2.3.4 超声辅助法提取黑木耳多糖的结果分析
• 2.3.5三种提取方法的比较
• 2.3.6 讨论
• 2.4 本章小结
• 3 黑木耳多糖分离纯化的研究
• 3.1 试验材料
• 3.1.1 原料
• 3.1.2 试剂
• 3.1.3 仪器
• 3.2 试验方法
• 3.2.1 黑木耳多糖分离纯化的工艺流程
• 3.2.2 黑木耳多糖的离子交换层析
• 3.2.3 黑木耳多糖的排阻层析
• 3.2.4 黑木耳多糖组分的纯度鉴定
• 3.3 结果与讨论
• 3.3.1 黑木耳多糖的离子交换层析
• 3.3.2 排阻层析制备黑木耳多糖组分
• 3.3.3 黑木耳多糖组分的纯度鉴定
• 3.4 本章小结
• 4 黑木耳多糖组分理化性质的研究
• 4.1 试验材料
• 4.1.1 材料
• 4.1.2 试剂
• 4.1.3 仪器
• 4.2 试验方法
• 4.2.1 黑木耳多糖组分的基本理化性质分析
• 4.2.2 黑木耳多糖组分的相对分子质量测定
• 4.2.3 黑木耳多糖组分的单糖组成分析
• 4.2.4 黑木耳多糖组分的红外光谱分析
• 4.3 结果与讨论
• 4.3.1 黑木耳多糖组分的基本理化性质分析
• 4.3.2 黑木耳多糖组分的相对分子质量测定
• 4.3.3 黑木耳多糖组分的单糖组成分析
• 4.3.4 黑木耳多糖组分的红外光谱分析
• 4.3.5 讨论
• 4.4 本章小结
• 5 黑木耳多糖抗疲劳活性的研究
• 5.1 试验材料
• 5.1.1 受试物
• 5.1.2 实验动物
• 5.1.3 试剂
• 5.1.4 仪器
• 5.2 试验方法
• 5.2.1 动物分组与给药
• 5.2.2 负重游泳实验及力竭游泳时间的测定
• 5.2.3 血乳酸（BLA）和血尿素氮（BUN）含量的测定
• 5.2.4 肝糖原（LG）和肌糖原（MG）含量的测定
• 5.2.5 数据分析
• 5.3 结果与讨论
• 5.3.1 黑木耳多糖对小鼠体重的影响
• 5.3.2 黑木耳多糖对小鼠耐力的影响
• 5.3.3 黑木耳多糖对小鼠血乳酸（BLA）和血尿素氮（BUN）的影响
• 5.3.4 黑木耳多糖对小鼠肝糖原（LG）和肌糖原（MG）的影响
• 5.3.5 讨论
• 5.4 本章小结
• 结论
• 参考文献
• 攻读学位期间发表的学术论文
• 致谢