蛋白酶体抑制剂MG132调控Nrf2/Keap1-ARE通路对大鼠肠缺血再灌注肠、肺损伤保护作用的研究

论文摘要

目的:研究蛋白酶体抑制剂MG132对大鼠肠缺血再灌注肠、肺损伤的保护作用与调控Nrf2/Keap1-ARE通路之间的关系。方法:将32只健康雄性SD大鼠随机分为4组:正常对照组、I/R组、对照+MG132预处理组、I/R+MG132预处理组。I/R组及I/R+MG132组使用无创动脉夹夹闭肠系膜上动脉（SMA）1小时、再灌注2小时,建立大鼠肠缺血再灌注损伤模型。MG132预处理组于缺血前30分钟腹腔注射0.5 mg/kg MG132,正常对照组仅进行剖腹术及SMA分离术。再灌注结束后,腹主动脉取血并留取肺肠组织样本。光镜下观察大鼠肠、肺石蜡切片组织形态学改变,评价组织损伤程度,检测血清中IL-6、TNF-α水平、26S蛋白酶体活性及组织匀浆中超氧化物歧化酶（SOD）、髓过氧化物酶（MPO）活性,采用免疫组织化学法和免疫印迹法检测肺、肠组织中核转录因子Nrf2（NF-E2-related factor 2）和血红素氧合酶-1（Heme Oxygenase-1,HO-1）蛋白表达。结果:1.与正常对照组相比,I/R组:（1）肺、肠组织有明显的水肿、渗出和炎性细胞浸润（P<0.01,P<0.01）,肺含水量明显升高（P<0.01）;（2）肺、肠组织SOD活性降低（P<0.01, P<0.01）,MPO活性增强（P<0.01, P<0.01）;（3）血清TNF-α、IL-6水平显著升高（P<0.01,P<0.01）;（4）血清26S蛋白酶体水平无明显变化（P>0.05）;（5）肺组织中Nrf2、HO-1和肠组织中Nrf2蛋白表达增强（P<0.01,P<0.01,P<0.01）。2.与正常对照组相比,对照+MG132预处理组:（1）肺、肠组织清除ROS的能力如SOD活性增强（P<0.05,P<0.05）;（2）血清26S蛋白酶体活性下降（P<0.05）;（3）肺组织中Nrf2和HO-1蛋白表达增多（P<0.01,P<0.01）,肠组织中Nrf2蛋白表达增强（P<0.01）。3.与I/R组相比,I/R+MG132预处理组:（1）肺、肠组织的病理损伤程度明显减轻（P<0.01,P<0.01）,肺含水量明显降低（P<0.05）;（2）肺、肠组织SOD活性升高（P<0.05,P<0.05）,MPO活性降低（P<0.01, P<0.01）;（3）血清TNF-α、IL-6水平降低（P<0.01,P<0.05）;（4）血清26S蛋白酶体活性降低（P<0.01）;（5）肺组织中Nrf2、HO-1表达增强（P<0.01,P<0.01）,肠组织中Nrf2蛋白表达增强（P<0.05）。结论:1.肠缺血再灌注可导致严重的肺、肠损伤,包括氧化性损伤、细胞因子激活、中性粒细胞活性增高等。2.MG132预处理可抑制蛋白酶体活性,通过Nrf2/Keap1-ARE信号通路激活Nrf2,进而抗氧化Ⅱ相酶HO-1蛋白表达上调,对肠缺血再灌注导致的肺、肠损伤产生明显保护作用,这种保护作用与Nrf2的核易位密切相关。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 附录
• 致谢