论文题目: Survivin基因在骨肉瘤中表达效应与干预治疗的实验研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 外科学
作者: 高大新
导师: 吕刚
关键词: 骨肉瘤,基因,细胞凋亡,细胞周期蛋白,反义寡核苷酸,顺铂,祼鼠,肿瘤移植,联合治疗
文献来源: 中国医科大学
发表年度: 2005
论文摘要: 目的 1.明确细胞凋亡抑制基因survivin及其相关因子caspase-3、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)在人骨肉瘤组织中的表达状态,探讨其与骨肉瘤恶性生物学行为的关系。 2.观测反义寡核苷酸(ASODN)体外封闭人骨肉瘤细胞survivin基因表达、诱导细胞凋亡效应及其对化疗药物顺铂(DDP)的增效作用。 3.探讨反义核酸技术与传统化疗联合应用,干预裸鼠荷骨肉瘤生长的综合治疗途径。 方法 1.采用原位杂交、免疫组织化学技术、DNA原位末端标记技术(TUNEL法)检测38例骨肉瘤、15例骨软骨瘤、5例正常骨组织中survivin mRNA表达及骨肉瘤组织caspase-3、cyclin D1蛋白表达状态和细胞凋亡情况;比较分析骨肉瘤中survivin mRNA表达与各因子表达的关系及其意义。 2.设计合成特异性靶向survivin的ASODN,以脂质体为载体,按不同浓度和时间对人骨肉瘤OS-732细胞进行转染,并设空白、正义(SODN)对照组同步比较。镜下观察各组细胞生长状况,采用RT-PCR、免疫细胞化学技术检测各组细胞中survivin mRNA、蛋白表达状态,流式细胞仪(FCM)、吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色法检测细胞凋亡水平和形态变化,MTT法检测细胞生长抑制情况,激酶活性测定法检测细胞中caspase-3活化程度。 在ASODN单独转染封闭OS-732细胞survivin基因表达基础上,增设DDP处理组及其与ASODN联合作用组,比较联合应用组与各单“药”组细胞生长状态差异。采用RT-PCR、免疫细胞化学技术检测各组细胞sur.vivin mRNA、蛋白表达状态,FCM、AO/EB染色法检测细胞凋亡水平和形态
论文目录:
一、摘要
1.中文论著摘要
2.英文论著摘要
二、英文缩略语
三、论文
论文一 survivin及其相关因子在骨肉瘤组织中的表达及意义
1.前言
2.实验材料与方法
3.实验结果(附论文图片)
4.讨论
5.结论
论文二 survivin反义寡核苷酸对人骨肉瘤细胞的抑制作用
第一部分 反义寡核苷酸封闭骨肉瘤细胞survivin基因表达的效应
1.前言
2.实验材料与方法
3.实验结果(附论文图片)
4.讨论
第二部分 survivin反义寡核苷酸促进顺铂诱导骨肉瘤细胞凋亡
1.前言
2.实验材料与方法
3.实验结果(附论文图片)
4.讨论
5.结论
论文三 survivin反义寡核苷酸联合顺铂对荷骨肉瘤裸鼠的干预治疗
1.前言
2.实验材料与方法
3.实验结果(附论文图片)
4.讨论
5.结论
四、本研究创新性的自我评价
五、参考文献
六、附录
1.综述
2.在学期间科研成绩
3.致谢
4.个人简介
发布时间: 2005-07-28
参考文献
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