论文摘要
目的近年国内外有关内质网应激（endoplasmic reticulum stress,ERS）的研究较多,但内质网应激参与心肌缺血/再灌注损伤的研究相对较少,特别是探讨内质网应激与烧伤后心肌细胞损伤的研究尚未见报道。牛磺酸（taurine,Tau）是心肌中含量最为丰富的游离氨基酸,具有调节细胞内钙稳态,抗氧化和抗炎作用等功能,对心血管细胞有良好的保护作用,Tau对烧伤后心肌损害的保护机制已有相关研究报道,但烧伤后心肌细胞ERS特点,牛磺酸对严重烧伤后心肌细胞ERS有何影响尚未见报道。本实验探讨严重烧伤后心肌细胞的ERS特点、过度ERS与心肌细胞损伤的关系及牛磺酸对其影响的分子机制,为牛磺酸在烧伤心肌损害防治中的应用提供了实验依据。方法1.建立大鼠30%TBSAⅢ度烫（烧）伤动物模型。2. HE染色普通光学显微镜观察烧伤后及牛磺酸治疗后心肌组织形态变化。3.用电镜观察烧伤大鼠心肌结构损伤情况及牛磺酸的保护作用。4.用放射免疫和酶联免疫法观测烧伤大鼠在伤后血浆和心肌中cTnT、TNFα含量的变化及牛磺酸的影响。5.用免疫组织化学方法分析大鼠心肌NF-ΚB、MAPKp38蛋白表达情况。6. RT-PCR测定基因GRP94、caspase-12的表达变化。结果1.通过HE染色及电镜观察发现烧伤后心肌组织严重损伤,经牛磺酸治疗后损伤减轻。2.放射免疫和酶联免疫法观测发现烧伤后血浆和心肌中cTnT、TNFα含量上升,牛磺酸治疗后两指标含量下降。3.免疫组织化学分析表明:烧伤后NF-ΚB、MAPKp38迅速增加,伤后6h达峰值,伤后24h仍高于对照组。牛磺酸治疗组心肌NF-ΚB,MAPKp38水平较烧伤组有显著性降低。4. RT-PCR检测结果显示,烧伤1h后GRP94、Caspase-12的表达较对照组有所升高,12h后达高峰,而牛磺酸治疗组两基因的表达量较烧伤组有显著性下降。结论1.严重烧伤后心肌GRP94和Caspase-12表达明显升高,表明严重烧伤后心肌存在内质网应激反应,且内质网应激参与了烧伤后心肌损伤。2.牛磺酸对严重烧伤后内质网应激介导的心肌损伤具有较好的保护作用,其分子机制主要是通过下调葡萄糖调节蛋白GRP94及内质网相关性死亡途径中Caspase-12的表达及其活性等。