肾乐片对家兔Masugi肾炎的实验研究

论文摘要

目的:通过注射羊抗兔抗肾血清建立家兔Masugi肾炎（masugi glomerulonephritis MGN）动物模型,并应用肾乐片不同剂量对该模型进行干预性治疗,观察对家兔MGN动物模型的24小时尿蛋白、血浆蛋白、血脂、肾功能、血流变、肾脏病理形态学的影响,探讨肾乐片对家兔MGN的疗效及可能的治疗机理,为临床应用提供实验及理论依据。方法:取家兔肾皮质匀浆,与弗氏完全佐剂制成混悬液,每隔2周给绵羊皮下注射,共4次,于末次注射后2周采羊血分离血清,加入等量兔红细胞于4℃过夜吸附,离心吸取上清液,于56℃水浴中灭活0.5h,即制得羊抗兔肾血清。选用普通级新西兰种大耳白兔,雌雄各30只,经普通饲料适应性喂养1周,检测尿蛋白和尿红细胞均为阴性,随机分为正常组、模型组、雷公藤多甙组、肾乐片低剂量组（低剂组）、肾乐片中剂量组（中剂组）、肾乐片高剂量组（高剂组）,每组10只。除正常组外,其余各组家兔经耳缘静脉注射羊抗兔肾血清,每次2ml,间隔0.5h,连续6次,测定尿蛋白为阳性表明模型成功。于造模后当天各治疗组和对照组开始灌胃给药,正常组和模型组灌服等量蒸馏水。各组动物自由进食、饮水。分别于造模后和实验第28天留取家兔24小时尿液进行24小时尿蛋白定量测定,第29天杀检动物,颈动脉插管取血,用全自动生化分析仪检测各组家兔血清总蛋白（TP）、白蛋白（Alb）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、尿素氮（BUN）、肌酐（Scr）。全自动血流变仪检测全血粘度高切变率（ηb200s-1）、全血粘度低切变率（ηb5s-1）、血浆粘度（ηp200s-1）、纤维蛋白原（Fig）、红细胞压积（HCT）。取肾组织在光镜、电镜、免疫荧光下观察其病理变化。结果:（1）24小时尿蛋白定量:造模后除正常组外,其余各组均出现大量蛋白尿,与正常组相比均有显著性差异（P<0.01）;实验第29天各治疗组与模型组相比,中剂组、高剂组和雷公藤多甙组尿蛋白定量均明显降低,有显著性差异（P<0.01）;低剂组尿蛋白虽有所下降,但与模型组相比无统计学意义（P>0.05）。高剂组尿蛋白稍高于雷公藤多甙组,但两组相比无统计学意义（P>0.05）。（2）生化检测:模型组血清BUN、Scr与正常组相比显著升高（P<0.01）;各治疗组与模型组相比,中剂组、高剂组和雷公藤多甙组血清BUN、Scr明显降低（P<0.01）;低剂组血清BUN、Scr虽比模型组低,但无统计学意义（P>0.05）;高剂组血清BUN、Scr稍高于雷公藤多甙组,但无显著性差异（P>0.05）。模型组血清TP、Alb较正常组明显降低（P<0.01）;中剂组、高剂组和雷公藤多甙组血清TP、Alb与模型组相比明显升高（P<0.01）;低剂组TP、Alb虽比模型组高,但无统计学意义（P>0.05）;高剂组血清TP、Alb稍低于雷公藤多甙组,但无显著性差异（P>0.05）。模型组与正常组相比,血清TC、TG均明显增高（P<0.01）;治疗组与模型组相比,中剂组、高剂组和雷公藤多甙组血清TC、TG明显降低（P<0.05,P<0.01）;低剂组TC、TG虽比模型组低,但无统计学意义（P>0.05）;高剂组TC、TG与雷公藤多甙组相比,无显著性差异（P>0.05）。（3）血液流变学检测:模型组ηb200s-1、ηb5s-1、HCT与正常组相比均显著升高（P<0.01）;各治疗组与模型组相比,中剂组、高剂组和雷公藤多甙组ηb200s-1、ηb5s-1、HCT明显降低（P<0.01）;低剂组虽比模型组低,但无统计学意义（P>0.05）;高剂组ηb200s-1、ηb5s-1、HCT低于雷公藤多甙组,有显著性差异（P<0.01,P<0.05）。模型组ηp200s-1、Fig与正常组相比显著升高（P<0.01）;各治疗组与模型组相比,中剂组、高剂组和雷公藤多甙组ηp200s-1、Fig均显著降低（P<0.01）;低剂组虽比模型组低,但无统计学意义（P>0.05）;高剂组ηp200s-1、Fig低于雷公藤多甙组,有显著性差异（P<0.01,P<0.05）。（4）肾组织病理形态学观察:与正常组相比,光镜下模型组肾小球毛细血管基底膜增厚,系膜细胞增生,系膜基质增多,部分肾小球局灶节段性硬化,肾小球囊壁层上皮细胞增生,可见细胞性新月体形成。部分肾小管管腔内可见蛋白管型,上皮细胞颗粒变性,间质炎症细胞浸润,可见间质散在纤维化。电镜下可见基底膜节段性不规则增厚,上皮细胞足突广泛融合,内皮细胞肿胀严重。肾乐片治疗大、中剂量组光镜电镜检查可见肾小球毛细血管基底膜轻度增厚及变性,系膜细胞轻度增生,未见新月体形成,肾小管、间质病变明显减轻,上皮细胞足突轻微融合,内皮细胞局部肿胀,与模型组相比病变明显减轻,与雷公藤多甙片治疗组相比,差别不明显。低剂组病变恢复不好但轻于模型组。免疫荧光所见,模型组肾小球毛细血管壁IgG呈点线沉积,荧光强度+++++,而雷公藤多甙组、肾乐片高、中剂量组IgG沉积及荧光强度明显弱于模型组,荧光强度约为+++。结论:1通过给正常家兔注射羊抗兔肾血清建立了家兔MGN模型。2肾乐片可降低家兔MGN的尿蛋白、提高血浆蛋白、改善脂代谢、改善血液高凝高粘、降低尿素氮及血肌酐,保护肾功能。3病理形态学检查结果提示:肾乐片能明显减轻肾脏组织损害,起到延缓肾脏向间质纤维化和肾小球硬化进展的作用。4肾乐片可能是通过调节机体免疫功能,调节脂质代谢,改善肾小球肾炎时的血液高粘状态,抑制炎症因子的分泌,抑制系膜细胞的增殖而发挥其治疗作用的。5肾乐片对家兔MGN模型的治疗作用与雷公藤多甙基本相同,但在某些方面有一定优势。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 研究论文 肾乐片对家兔Masugi 肾炎的实验研究
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 附图
• 附表
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述
• 致谢
• 个人简历