不同浓度的类胰岛素生长因子-1（IGF-1）对组织工程肌腱细胞增殖作用的实验研究

论文摘要

目的 类胰岛素生长因子-1（IGF-1）是一种潜在的促有丝分裂剂,对肌腱细胞有促进分裂增贿的作用,肌腱细胞体外培养成功后,将不同浓度改种生长因子作用于第二代肌腱细胞,观察其对细胞增殖的影响并探讨其量效关系。方法 本实验以胎龄为19天的鸡胚肌腱为材料,用酶消化后,将分离的细胞用20%的胎牛血清营养液培养,贴壁达80%后传代。观察肌腱细胞形态及生长规律。取第二代肌腱细胞接种于六孔板,分别给予不同浓度的胎牛血清,观察血清浓度对肌腱贴壁及生长的影响。取第二代肌腱细胞接种于96孔板,分别给予不同浓度的胰岛素生长因子-1,分为七组,1ng组,5ng组,10ng组,50ng组,200ng组,阳性对照,阴性对照组,用MTT实验进行比较,观察其对肌腱生长的影响。采用瑞士-姬姆萨染色观察不同浓度的胰岛素生长因子-1对细胞增殖的影响。结果 肌腱细胞形态类似成纤维细胞。贴壁后生长很快,原代细胞一般一周左右即可传代,传代后细胞进入旺盛增殖阶段,增殖速度与营养液中胎牛血清浓度呈正相关。在行四唑盐比色实验（MTT）实验时,因肌腱细胞在5%及10%胎牛血清浓度下增殖过快,MTT作用不明显,而采用2%胎牛血清培养液培养时,发现IGF-1对肌腱细胞增殖速度有明显促进作用。加IGF-1胎牛血清培养液第一天后,MTT检查发现:肌腱细胞增殖速度随IGF-1浓度增加而有增大趋势:1ng组与5ng组与阴性对照差异无显著性;5ng组肌腱细胞增殖高于阴性对照组;10ng组肌腱细胞增殖高于1ng组、5ng组、阴性对照组及阳性对照组;

论文目录

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• 前言
• 仪器及试剂
• 实验过程
• 结果
• 讨论
• 小结
• 参考文献
• 综述
• 致谢