松茸提取物抗肿瘤作用的研究

论文摘要

本文对松茸大分子提取物进行分离、纯化,然后进行各有效成分的抗肿瘤实验研究,确定抗肿瘤作用的有效成分,使用药量大大降低,用药途径进一步拓展,进而有利于新产品的开发。提取时,先进行了一些单因素试验,然后对确定出的料水比、浸提温度、浸提时间三个因素进行了正交试验,得出了水提时的最佳王艺条件,而经生产经济核算,最终确定料水比:1:30;浸提温度:120℃:浸提时间:3h,该条件下,多糖得率为8.12%。纯化时,系统地进行了脱蛋白研究。采用了Sevag法、酶法结合Sevag法、三氯乙酸法、1万分子截留量膜超滤、阴阳离子交换树脂法脱蛋白。用弱碱性阴离子和弱酸性阳离子交换树脂一次串联进行粗多糖脱蛋白,效果十分理想。该法条件温和、有部分脱色效果、易工业化,蛋白脱除率达92.36%,多糖回收率为82.85%,经1万截留分子量透析膜透析,冷冻干燥后所得松茸多糖精粉为淡黄色粉末,其多糖含量达89.27%,蛋白质含量为4.55%。用松茸多糖ABMPⅠ、ABMPⅡ灌胃给药,对小鼠S180实体瘤均有一定的抑瘤作用,其中ABMPⅠ的抑瘤作用较ABMPⅡ好。两个组分对小鼠S180实体瘤的抑制都呈现出剂量相关性,灌胃剂量为200mg/kg.d时,ABMPⅠ的抑瘤率为46.3%:ABMPⅡ的抑瘤率为38.7%。松茸多糖ABMPⅠ、ABMPⅡ灌胃给药,对小鼠肝癌腹水实体瘤有较好的抑瘤作用,其中ABMPⅠ的抑瘤作用较ABMPⅡ好。两个组分对小鼠肝癌腹水实体瘤的抑制都呈现出剂量相关性,灌胃剂量为200mg/kg.d时,ABMPⅠ的抑瘤率为53.4%;ABMPⅡ的抑瘤率为40.1%。通过灌胃给药,松茸菌丝体粗多糖和松茸胞外多糖对小鼠S180实体瘤都有较好的抑制效果。松茸菌丝体粗多糖灌胃剂量为500mg/kg.d时,抑瘤率为52.8%;松茸胞外多糖灌胃剂量为300mg/kg.d时,松茸胞外多糖的抑瘤率为54.6%,当灌胃剂量增加时,抑瘤率反而下降,说明在高剂量下,松茸胞外多糖对小鼠的免疫系统有抑制作用。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 引言
• 第一章 文献综述
• 1.研究目的
• 2.食用菌多糖国内外研究现状
• 2.1 真菌多糖类产品开发现状
• 3.糖的功能性
• 3.1 多糖的免疫调节作用
• 3.2 多糖药理作用
• 4.目前多糖研究中存在的问题
• 4.1 多糖结构和功能的关系至今尚不十分清楚
• 4.2 多糖的结构测定方法远未达到像蛋白质和核酸结构测定那样自动化、微量化和标准化
• 4.3 多糖的合成远比多肽、核酸的合成复杂、困难
• 4.4 多糖样品的提取较为困难
• 5.现代分离重组技术在植物功能成分提取中的应用
• 5.1 膜提取分离技术
• 5.2 超临界流体萃取技术（Supereritical Fluid Extraction,SFE）
• 5.3 微波萃取技术（Mierowave Assisted Extraction,MAE）
• 5.4 大孔树脂吸附分离技术
• 5.5 层析技术
• 6.本实验研究的意义及研究内容
• 6.1 研究意义
• 6.2 主要研究内容
• 第二章 松茸多糖的提取研究
• 1.材料与方法
• 1.1 原料、试剂材料及仪器
• 1.2 实验方法
• 2.结果与讨论
• 2.1 子实体粉碎目数
• 2.2 热水浸提工艺的确定
• 3 本章小结
• 第三章 松茸子实体多糖的分离纯化研究
• 1.实验材料
• 1.1 原料、试剂材料及仪器
• 2.实验方法
• 2.1 蛋白质含量测定
• 2.2 凝胶过滤HPLC分析
• 2.3 超滤实验
• 2.4 Sevag法脱蛋白
• 2.5 Sevag法结合酶法脱蛋白
• 2.6 三氯乙酸脱蛋白
• 2.7 离子交换树脂脱蛋白
• 2.8 凝胶自备柱层析分离
• 2.9 凝胶预装柱层析系统分离
• 3 结果与讨论
• 3.1 超滤法纯化松茸粗多糖
• 3.2 Sevag法脱蛋白
• 3.3 Sevag法结合酶法脱蛋白
• 3.4 三氯乙酸脱蛋白
• 3.5 离子交换树脂脱蛋白
• 2O₂脱色'>3.6 H₂O₂脱色
• 3.7 分级醇沉分离纯化松茸多糖
• 3.8 凝胶制备柱层析分离
• 3.9 ABMF2采用预装柱分离
• 4 本章小结
• 第四章 松茸多糖的抗肿瘤活性研究
• 1.实验材料
• 1.1 原料
• 1.2 实验动物
• 1.3 环磷酰胺（CTX）
• 1.4 瘤株
• 1.5 主要试剂
• 1.6 主要仪器
• 2.实验方法
• 2.1 瘤细胞悬液的制备与接种
• 2.2 分组
• 2.3 给药
• 2.4 疗效评价
• 2.5 数据处理
• 3.实验结果
• 180实体瘤的抑制作用'>3.1 ABMPⅠ、ABMPⅡ对小鼠S₁₈₀实体瘤的抑制作用
• 3.2 ABMPⅠ、ABMPⅡ对肝癌腹水小鼠实体瘤的抑制作用
• 180实体瘤的抑制作用'>3.3 松茸菌丝体粗多糖和胞外多糖对小鼠S₁₈₀实体瘤的抑制作用
• 4.本章小结
• 180实体瘤均有抑制作用'>4.1 ABMPⅠ、ABMPⅡ对小鼠S₁₈₀实体瘤均有抑制作用
• 4.2 ABMPⅠ、ABMPⅡ对小鼠肝癌腹水实体瘤均有抑制作用
• 180实体瘤均有抑制作用'>4.3 菌丝体粗多糖和胞外多糖对小鼠S₁₈₀实体瘤均有抑制作用
• 第五章 总结
• 致谢
• 参考文献