论文摘要
目的:初步探索鼻咽癌患者放、化疗前和放、化疗过程中所出现的四种中医证型(痰浊结聚型、气血凝结型、津液亏损型、脾胃气虚型)与T细胞亚群(CD3、CD4、CD8、CD4/CD8)的相关性,以寻求鼻咽癌中医辨证分型的客观依据,为鼻咽癌的综合治疗提供参考依据。方法:随机抽取被泸州医学院肿瘤科收治的、经临床和病理确诊且未经任何治疗的鼻咽癌患者,经中医临床辩证符合所需中医辨证分型的患者40例,其中痰浊结聚型和气血凝结型各20例,年龄18—70岁;化疗后出现所需中医辨证分型(脾胃气虚型)的患者20例;放疗后出现所需中医辨证分型(津液亏损型)的患者20例。正常对照组:20名健康志愿者,年龄18—70岁。均清晨空腹抽取静脉血2ml,EDTA抗凝。应用荧光直接标记法及流式细胞仪检测外周血单个核细胞(PBMC)膜表面CD3、CD4、CD8。取美国BECKMAN COULTER公司生产的CD3/CD4/CD8三色荧光标记单克隆抗体20μl,加入100μlEDTA抗凝的外周血,室温下孵育20 min,加人红细胞裂解液650μl,稍后再加入细胞保护液265μl,然后上机检测。检测前采用标准荧光微球Flow-check校准FLI、FL2、FL4及SS、FS通道的准确性,使各通道CV<2%。最后统计分析每种中医证型T细胞亚群(CD3、CD4、CD8、CD4/CD8)的表达水平及与正常对照组之间的关系。结果:在治疗前出现的两个中医证型组(痰浊结聚型和气血凝结型)中CD4表达水平和CD4/CD8较健康人组偏低,CD8表达水平与健康人组相比偏高,而治疗前出现的两个中医证型组中气血凝结型组的CD3表达水平较健康人组也偏低,而痰浊结聚型组的CD3表达水平反而比健康人组的偏高,上述各种比较结果显示差异均无统计学意义(P>0.05);化疗后出现的中医证型脾胃气虚型组CD3、CD4表达水平较健康人组偏高,CD8表达水平较健康人组明显的偏低,但其比较结果显示差异无统计学差异(P>0.05),其CD4/CD8也明显的高于健康人组,且其比较结果显示差异具有统计学意义(P<0.05);在放疗后出现的中医证型津液亏损型组与健康人组相比其CD3表达水平降低,差异无统计学意义(P>0.05),而CD4表达水平和CD4/CD8的比值较健康人组相比也有明显降低,CD8表达水平较健康人组升高,其比较结果均显示差异具有统计学意义(P<0.05);在治疗前后出现的中医证型组之中,津液亏损型组的CD3表达水平最低,痰浊结聚型组和脾胃气虚型组其CD3的表达水平相似,均高于气血凝结型组和津液亏损型组,气血凝结型组的CD3表达水平介于津液亏损型组与痰浊结聚型组(或脾胃气虚型组)之间,但上述各组比较结果均显示差异无统计学意义(P>0.05);治疗前出现的两个中医证型组在CD4的表达水平上,痰浊结聚型组较气血凝结型组高,两者CD8表达水平和CD4/CD8相似,其比较结果均显示差异不具有统计学意义(P>0.05);化疗后出现的脾胃气虚型组CD4的表达水平和CD4/CD8均明显高于治疗前出现的两个中医证型组和放疗后出现的津液亏损型组,CD8表达水平则明显低于治疗前出现的两个中医证型组和放疗后出现的津液亏损型组,其比较结果均显示差异具有统计学意义(P<0.05),放疗后出现的津液亏损型组其CD4表达水平和CD4/CD8均明显低于治疗前出现的两个中医证型组和化疗后出现的脾胃气虚型组,而CD8表达水平则明显高于治疗前出现的两个中医证型组和化疗后出现的脾胃气虚型组,其比较结果均显示差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:1.在CD3表达水平上,健康人及鼻咽癌患者治疗前后出现的中医证型上变化幅度较小,与中医证型的相关性较小。2.在CD4、CD8表达水平上及CD4/CD8比值的变化上,在鼻咽癌患者治疗前后出现的中医证型上变化较明显,可以作为中医辨证分型的客观依据。3.健康人组与治疗前出现的两个中医证型组(痰浊结聚型和气血凝结型)相比,在CD4和CD8表达水平及CD4/CD8的比值上变化较小;健康人组与化疗后出现的脾胃气虚型组相比,在CD4和CD8表达水平上变化较小,但在CD4/CD8的比值上变化较明显;健康人组与放疗后出现的津液亏损型组相比,在CD4和CD8表达水平及CD4/CD8的比值上变化均较明显。因此,T细胞亚群的变化不能作为区分健康人与鼻咽癌患者以及鼻咽癌各证型的独立依据。4.T细胞亚群对鼻咽癌中医辨证分型有较大价值,所建立的判别函数式经回顾性检验,总体判断的正确率为58.0%,说明其对鼻咽癌各中医证型的判别效果相对较好,具有一定的参考价值,为中医临床辨证分型提供了较好的客观依据。