论文摘要
土壤是人类环境的基本要素之一,是人类赖以生存和进行生产活动的物质基础,它与人类健康有着密切的联系。大量施用化肥、农药以及其他一些化学物质,而且其施用量将可能在很长时间内维持较高的水平,这些化学物质在土壤中不断积累,使生态系统受到严重的干扰和破坏,引起土壤环境恶化、土壤肥力下降和土壤生产力下降等,也使污染土壤的面积进一步增加。因此,农药污染土壤的修复技术的研究,具有十分重要的意义。本研究以长期被多菌灵污染的蔬菜大棚土壤为研究对象,研究了氨基甲酸酯类杀菌剂多菌灵对土壤中各微生物种群和几种土壤酶活性的影响;通过富集培养的方法分离、筛选到能够降解多菌灵的细菌菌株DJ-1和真菌菌株T8.2各一株,通过对其生理生化以及菌体形态、菌落特征等的考察,确定其菌属;并对其降解多菌灵的条件进行了研究。其主要实验结果如下:1.在试验阶段,土壤中细菌受到了明显的抑制作用,后期才逐渐恢复至对照水平;放线菌则表现出先受抑制后被激发的变化;而真菌受到抑制后最终未能恢复至对照水平。多菌灵对过氧化氢酶表现出促进作用、对脲酶表现出先抑制后促进的作用,而对蔗糖酶则表现微弱的抑制作用。2.通过富集培养的方法,分离、筛选到能够降解多菌灵的细菌和真菌各一株,通过对其生理生化以及菌体形态、菌落特征等的考察,初步确定其分别为假单胞菌(Pseudomonas)和木霉(Trichoderma)。3.实验发现,培养条件对降解菌株的生长以及对多菌灵的降解都有较大的影响,只有在适宜的环境条件下,菌株才能充分发挥其降解能力,菌株对多菌灵降解的最佳条件与其最适生长条件相一致,且外加碳氮源的加入能够大大促进菌体的生长以及其对多菌灵的降解。pH7.0、培养温度为30℃、接种量10%、加入0.5%蛋白胨时,为菌株DJ-1降解多菌灵的最佳条件,此时其对100mg/L的多菌灵的降解率可达90%;pH6.0、培养温度为25℃、接种量10%、加入0.5%酵母粉时,为菌株T8.2降解多菌灵的最佳条件。而两菌株均能对几种常用农药的起到降解作用。4.分别对发酵过程中发酵时间、培养温度、初始pH值、接种量以及培养基装液量进行考察,并对培养基进行了优化。结果表明:细菌DJ-1在pH7.0、30℃、装液量为50/250ml下培养36h后活菌数达到最大,通过正交实验对其培养基进行优化而得到的最优组合为A2B3C1D2(即牛肉膏0.6%、蛋白胨2%、葡萄糖1%和NaCl 0.8%)。采用液-固两相发酵法对菌株T8.2进行发酵,其发酵最佳温度为25℃、培养基初始pH值为5.5,固相发酵时间为7d。而对其培养基进行优化发现,控制秸秆:麸皮为7:3时,菌株产孢数最大,孢子数可达1010cfu/g,且此发酵主要原料秸秆是便宜、易得的。5.对降解菌株在土壤中的降解情况进行考察,其结果表明:接种量直接影响菌株对多菌灵的降解,当接种量为10%时,细菌和木霉在原土中对多菌灵的降解率分别为86.1%和75.2%,在风干土中和烘干土中均次之。原土中菌株对多菌灵的降解要明显优于风干和烘干处理中,这可能是由于原土中部分土著微生物的存在对菌株降解多菌灵起到了一定的促进作用。控制细菌和木霉混合比例为1:1时,降解效果也要稍优于添加单一菌种,可能是菌种相互叠加之后起到了一定的协同作用。
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摘要ABSTRACT第一章 前言§1-1 农药污染的危害§1-2 我国土壤农药污染现状1-2-1 常用化学农药的种类和特点1-2-2 我国土壤农药污染现状§1-3 农药污染带来的各方面影响1-3-1 农药污染对土壤的影响1-3-2 农药污染对农作物的影响1-3-3 农药污染对农产品的影响§1-4 农药污染的修复研究1-4-1 理化修复1-4-2 植物修复1-4-3 生物修复§1-5 农药的微生物降解1-5-1 降解农药的微生物类型1-5-2 微生物降解农药的途径§1-6 多菌灵研究进展1-6-1 氨基甲酸酯农药的结构、分类和用途1-6-2 氨基甲酸酯农药污染的生物修复研究现状1-6-3 多菌灵性质及应用1-6-4 多菌灵对不同病菌毒力的研究进展1-6-5 多菌灵对不同病菌抗药性的研究进展1-6-6 多菌灵残留降解的必要性1-6-7 多菌灵降解的研究§1-7 本研究的目的和内容第二章 多菌灵对土壤微生物种群和酶活性的影响§2-1 材料与仪器2-1-1 材料2-1-2 培养基2-1-3 试剂2-1-4 仪器§2-2 实验方法2-2-1 试验设计2-2-2 土壤含水量的测定2-2-3 土壤微生物的计数2-2-4 土壤酶的测定2-2-5 数据处理§2-3 结果与分析2-3-1 多菌灵对土壤微生物的生态效应2-3-2 多菌灵对土壤酶活性的效应§2-4 小结第三章 多菌灵降解细菌菌株的分离、鉴定及对多菌灵降解条件的研究§3-1 材料与仪器3-1-1 材料3-1-2 培养基3-1-3 试剂3-1-4 仪器§3-2 实验方法3-2-1 多菌灵降解菌株的分离及纯化3-2-2 降解菌种子液的制备3-2-3 菌株对多菌灵的降解情况3-2-4 降解菌降解多菌灵条件的测定§3-3 结果与分析3-3-1 降解细菌的分离与鉴定3-3-2 菌株对多菌灵的降解情况3-3-3 培养温度对多菌灵降解的影响3-3-4 初始 pH 值对多菌灵降解的影响3-3-5 接种量对多菌灵降解的影响3-3-6 外加碳氮源对多菌灵降解的影响3-3-7 多菌灵起始浓度的影响3-3-8 菌株 DJ-1 对其他几种农药的利用情况§3-4 小结第四章 多菌灵降解真菌菌株的分离、鉴定及对多菌灵降解条件的研究§4-1 材料与方法4-1-1 材料4-1-2 培养基4-1-3 试剂4-1-4 仪器§4-2 实验方法4-2-1 多菌灵降解菌株的分离及纯化4-2-2 降解菌种子液的制备4-2-3 降解菌降解多菌灵条件的研究§4-3 结果与分析4-3-1 降解真菌的分离与鉴定4-3-2 培养温度对多菌灵降解的影响4-3-3 初始pH 对多菌灵降解的影响4-3-4 外加碳氮源对多菌灵降解的影响4-3-5 多菌灵起始浓度的影响8.2 对其他几种农药的利用情况'>4-3-6 菌株 T8.2对其他几种农药的利用情况§4-4 小结第五章 降解菌发酵条件的研究§5-1 材料和仪器5-1-1 菌种5-1-2 培养基5-1-3 仪器§5-2 实验方法5-2-1 种子液的制备5-2-2 培养5-2-3 细菌发酵条件实验5-2-4 真菌发酵条件实验§5-3 结果与分析5-3-1 降解细菌的发酵条件研究5-3-2 降解真菌的发酵条件研究§5-4 小结第六章 多菌灵的降解实验§6-1 材料与仪器6-1-1 材料6-1-2 培养基6-1-3 试剂6-1-4 仪器§6-2 实验方法6-2-1 土壤中多菌灵降解实验6-2-2 降解菌株对多菌灵的降解情况6-2-3 降解菌对多菌灵的利用6-2-4 诱导作用对多菌灵降解的影响§6-3 结果与分析6-3-1 土壤中多菌灵降解实验6-3-2 降解菌株对多菌灵的降解情况6-3-3 降解菌对多菌灵的利用6-3-4 诱导作用对多菌灵降解的影响6-3-5 多菌灵可能的降解途径§6-4 小结第七章 结论参考文献致谢攻读学位期间所取得的相关科研成果
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标签:多菌灵论文; 生物降解论文; 农药残留论文; 假单胞菌论文; 木霉论文;