论文摘要
【目的】利用化疗药物对舌鳞状细胞癌细胞株Tca8113反复筛选、诱导，建立具有耐药性的鳞癌细胞株，并与亲代细胞株Tca8113对比生长特性及基因谱表达改变。初步探讨口腔鳞癌的耐药机制，为口腔鳞癌临床化疗方法改进提供理论依据。【方法】1、体外培养舌鳞状细胞癌细胞株Tca8113。利用MTT法进行舌癌细胞株Tca8113的梯度急性毒性试验，了解各种化疗药物不同浓度对舌癌细胞株Tca8113的杀伤效应，估计化疗药物的长期效应，为耐药细胞株的诱导、筛选寻找合适的初始剂量和药物浓度提升梯度。2、利用卡铂（carboplatin，Ca）和5-氟脲嘧啶（5-flurouracil，5-Fu）间歇给药的方法杀死绝大部分敏感的Tca8113细胞后，撤除化疗药物，让剩余的细胞在无药培养基中继续培养，使其逐渐恢复生长达到可以常规传代的水平。再次加入化疗药物，重复以上过程，通过反复诱导、筛选，得到两株耐药细胞，分别命名为Tca8113／Ca和Tca8113／Fu。3、对比亲代细胞株Tca8113及其耐药细胞株Tca8113／Ca和Tca8113／Fu之间的形态改变，倍数增长时间长短和细胞周期分布。4、分别抽提亲代细胞株和两个耐药细胞株（Tca8113，Tca8113／Ca和Tca8113／Fu）的总RNA，再由总RNA合成双链DNA，合成生物素标记的cRNA作为探针，寡核苷酸芯片制备，探针与芯片靶标杂交，洗脱，染色，芯片扫描，数据检测与分析，对比它们基因表达谱的改变。【结果】1、通过间歇加药的方法建立了舌鳞癌细胞株Tca8113的卡铂和5-氟脲嘧啶耐药细胞株，分别命名为Tca8113／Ca（耐药指数RI=2.86）和Tca8113／Fu（RI=2.31）；2、与亲代细胞株Tca8113相比，Tca8113／Ca的细胞形态变圆变小，生长明显减慢，流式细胞仪细胞周期检测显示增殖率降低，Tca8113／Fu的细胞形态变大变长，圆形及不规则细胞减少，生长速度和细胞增殖率无明显改变；3、用耐药细胞株Tca8113／Ca和Tca8113／Fu的基因表达谱对比亲代细胞株Tca8113基因表达谱，Tca8113／Ca有67条基因表达出现差异，其中21条基因发生上调，46条发生下调。Tca8113／Fu与亲代细胞株相比有33条基因发生改变，其中14条基因发生上调，19条基因下调。【结论】1、成功建立舌鳞状细胞癌细胞株Tca8113的卡铂和5-氟脲嘧啶耐药细胞株，分别命名为Tca8113／Ca和Tca8113／Fu；2、利用基因芯片进行基因表达谱比较，发现DNA依赖性转录调节及转录相关基因群可能与舌鳞状细胞癌耐药性有关，细胞运动相关基因在Tca8113／Ca表达谱中也出现改变。
论文目录
相关论文文献
- [1].影响早期舌鳞状细胞癌颈部淋巴结转移相关因素研究[J]. 现代口腔医学杂志 2020(01)
- [2].富含脯氨酸的酪氨酸激酶2和磷酸化的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶在舌鳞状细胞癌组织中的表达及临床意义[J]. 华西口腔医学杂志 2018(01)
- [3].舌鳞状细胞癌组织中COX-2、VEGF、MMP-9和Bcl-2表达水平及临床意义[J]. 解放军医药杂志 2017(04)
- [4].舌鳞状细胞癌侵袭和转移的研究进展[J]. 口腔疾病防治 2016(05)
- [5].组蛋白去乙酰化酶2在人舌鳞状细胞癌中的表达[J]. 昆明医科大学学报 2018(08)
- [6].牛磺酸上调基因1在舌鳞状细胞癌中的作用研究[J]. 口腔疾病防治 2016(09)
- [7].舌鳞状细胞癌中lncRNA-miRNA-mRNA ceRNA网络的整合分析[J]. 中国口腔颌面外科杂志 2019(05)
- [8].老年舌鳞状细胞癌的手术治疗及放射治疗疗效分析[J]. 中国肿瘤临床与康复 2014(06)
- [9].HIF-1α的表达与舌鳞状细胞癌关系的系统评价[J]. 实用口腔医学杂志 2014(03)
- [10].舌鳞状细胞癌预后多因素分析[J]. 实用肿瘤杂志 2012(02)
- [11].舌鳞状细胞癌相关长链非编码RNA的筛选与分析[J]. 生物技术 2018(02)
- [12].微小RNA-758-3p在舌鳞状细胞癌细胞株中的表达及其对肿瘤细胞增殖和迁移的影响[J]. 实用医学杂志 2018(11)
- [13].舌鳞状细胞癌免疫治疗的研究进展[J]. 国际口腔医学杂志 2008(04)
- [14].血小板衍生生长因子D在舌鳞状细胞癌中的表达及意义[J]. 中华口腔医学研究杂志(电子版) 2019(03)
- [15].乙醇诱导舌鳞状细胞癌上皮细胞间质转化[J]. 中华口腔医学研究杂志(电子版) 2016(06)
- [16].转酮醇酶样蛋白1在舌鳞状细胞癌中的表达及意义[J]. 口腔疾病防治 2016(03)
- [17].非编码RNA在舌鳞状细胞癌中的研究进展[J]. 国际口腔医学杂志 2018(04)
- [18].紫杉醇、丝裂霉素、顺铂3种化疗药物对舌鳞状细胞癌细胞增殖能力的影响观察[J]. 世界最新医学信息文摘 2017(67)
- [19].舌鳞状细胞癌颈淋巴结转移特点及临床治疗[J]. 当代医学 2019(21)
- [20].探讨舌鳞状细胞癌转移淋巴结包膜外浸润的相关因素及对预后的影响[J]. 临床口腔医学杂志 2019(01)
- [21].舌鳞状细胞癌相关差异基因的生物信息学及预后分析[J]. 临床口腔医学杂志 2018(03)
- [22].cIAP-1表达与舌鳞状细胞癌淋巴结转移的相关性[J]. 国际口腔医学杂志 2009(02)
- [23].低氧增强自噬促进舌鳞状细胞癌细胞迁移和侵袭[J]. 中华口腔医学研究杂志(电子版) 2016(06)
- [24].舌鳞状细胞癌中肿瘤干细胞耐药性研究[J]. 口腔医学研究 2012(01)
- [25].尼妥珠单抗注射液对舌鳞状细胞癌患者氧化应激反应及相关因子水平的影响[J]. 中国医学创新 2019(30)
- [26].舌鳞状细胞癌复发相关因素分析[J]. 实用癌症杂志 2009(01)
- [27].舌鳞状细胞癌中肿瘤干细胞对放疗敏感性体外研究[J]. 口腔生物医学 2014(03)
- [28].舌鳞状细胞癌组织中硫氧还蛋白和硫氧还蛋白还原酶-1的表达及其意义[J]. 癌变·畸变·突变 2018(02)
- [29].舌鳞状细胞癌放疗后骨肉瘤1例报告及文献复习[J]. 中国口腔颌面外科杂志 2018(06)
- [30].舌鳞状细胞癌组织中CD44和CD133的表达及临床意义[J]. 潍坊医学院学报 2016(04)