论文摘要
为了确定壳寡糖对南美白对虾和三疣梭子蟹生长和免疫状况的影响。以壳聚糖为原料,用壳聚糖酶酶解制备壳寡糖,对酶解条件进行了研究。通过对酶解液超滤、冷冻干燥等工艺制备了不同脱乙酰度、不同分子量级别的壳寡糖。将制得的壳寡糖应用到南美白对虾和三疣梭子蟹养殖中,研究了壳寡糖添加量、脱乙酰化度、分子量级别对其生长及免疫力的影响,确定出壳寡糖在南美白对虾和三疣梭子蟹养殖中的最佳添加量,为壳寡糖在水产养殖中的进一步应用推广奠定基础。研究表明壳聚糖最适酶解条件为:酶用量3.0mL/g、底物浓度3.0%(w/v)、温度45℃、pH5.8、反应时间12h。通过对酶解液进行超滤、冷冻干燥后,得到了不同脱乙酰度(74.5%、85.3%、93.2%)、不同分子量级别(3kDa以下、3kDa～5kDa和5kDa～10kDa)的壳寡糖。研究结果表明,与对照组相比,在基础饲料中添加壳寡糖可以显著提高南美白对虾的生长速度、成活率、血细胞密度,酸性磷酸酶、溶菌酶和过氧化物酶活力(P<0.05),当壳寡糖添加量为0.25g/kg和0.5g/kg时促进效果较好。壳寡糖添加量为0.25g/kg和0.50 g/kg时可在一定程度上提高南美白对虾血清中的总超氧化物歧化酶活力,但与对照相比差异不显著(P>0.05)。不同的脱乙酰度和不同的分子量级别对南美白对虾的生长和非特异性免疫影响差异不显著(P>0.05),随着脱乙酰度的增加和分子量的减小促进效果呈非规律性上升趋势。综合考虑饲料成本和壳寡糖对南美白对虾生长和免疫力的影响,确定壳寡糖在南美白对虾养殖中的添加量为0.25~0.50 g/kg,壳寡糖的脱乙酰度大于74.5%,分子量10kDa以下。在基础饲料中添加壳寡糖可以显著提高三疣梭子蟹的增重率(P<0.05)。添加壳寡糖可明显三疣梭子蟹的血细胞密度和成活率(P>0.05),脱乙酰度和分子量级别对其影响不显著(P>0.05)。在基础饲料中添加壳寡糖可以显著性提高三疣梭子蟹血清中总超氧化物歧化酶、酸性磷酸酶、溶菌酶和过氧化物酶活力(P<0.05),当添加量为1.0g/kg时促进效果最好。脱乙酰度对三疣梭子蟹的生长和非特异性免疫影响差异不显著。壳寡糖分子量级别小于5kDa与5kDa～10kDa相比,三疣梭子蟹生长率显著提高(P<0.05)。综合考虑决定壳寡糖在三疣梭子蟹饲料中的添加量为1.0g/kg,壳寡糖的脱乙酰度大于74.5%,分子量5kDa以下。