不同血清型副鸡嗜血杆菌差异的比较

论文摘要

副鸡嗜血杆菌是引起鸡传染性鼻炎的病原体,分为A、B、C三个血清型,本菌兼性厌氧,可以引起急性呼吸道病。可导致蛋鸡产蛋率和孵化率下降,从而造成严重的经济损失。目的:通过研究不同血清型副鸡嗜血杆菌在生长特性、致病性、敏感性和外膜蛋白方面的差异,为临床诊疗、B型菌疫苗的研制和从蛋白组学进一步研究该菌提供了技术保障。方法:将菌种在TSA培养基上厌氧培养24h,然后挑取单个菌落在TSB培养基中培养16h,待培养基变浑浊时开始测OD600,每隔2h测一次,进行记录。将117只未接种过传鼻疫苗的蛋鸡分为三组,每只鸡眶下窦注射已培养12h的菌液0.25ml,每一组攻一个血清型,24h后开始观察发病情况。将125、62.5、32、16、8 mg/ ml连翘提取物分别加入到已有10ml液体培养基的试管后,再向每管中接入已活化的对应菌0.1ml,将试管置于37℃恒温摇床中培养,每间隔2h测定并记录OD600值。将已培养好的菌液进行冰浴、离心、重悬、超声破碎等提取其外膜蛋白,然后将外膜蛋白进行等电聚焦、SDS-PAGE,得到不同血清型的双向电泳图。结果:通过生长特性实验发现,B和C型副鸡嗜血杆菌的OD600在12h到达最高峰,而A型菌则在10h到达高峰,然后开始下降。通过致病性实验发现,C型菌的持续感染能力最强,B型菌次之,A型菌最弱。通过对药物敏感性实验发现,A、B型菌的最佳抑菌浓度为32mg/ml,而C的为16mg/ml。通过不同血清型外膜蛋白的双向电泳图发现,不同血清型外膜蛋白的结构有着明显的差异。结论:不同血清型的副鸡嗜血杆菌在生长特性、致病性、敏感性和外膜蛋白方面有着比较大差异性。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 引言
• 1.1 国内外研究现状
• 1.1.1 菌落形态
• 1.1.2 生化特征
• 1.1.3 抵抗力
• 1.1.4 致病性
• 1.1.5 血凝素与抗原性
• 1.1.6 Hpg 的分型方法
• 1.1.7 流行病学
• 1.1.8 临床症状
• 1.1.9 剖检病变
• 1.2 病理组织变化
• 1.3 诊断
• 1.3.1 病原的分离和鉴定
• 1.3.2 血清学诊断
• 1.3.3 分子生物学诊断
• 1.4 鉴别诊断
• 1.5 预防与控制
• 1.5.1 管理措施
• 1.5.2 药物预防
• 1.5.3 疫苗预防
• 1.6 研究目的及意义
• 2 材料和方法
• 2.1 试验材料
• 2.1.1 试验动物及菌株
• 2.1.2 主要试剂及药品
• 2.1.3 主要仪器
• 2.2 试验方法
• 2.2.1 不同血清型副鸡嗜血杆菌的培养
• 2.2.2 不同血清型副鸡嗜血杆菌生长特性差异的研究
• 2.2.3 不同血清型副鸡嗜血杆菌的致病性试验
• 2.2.4 不同副鸡嗜血杆菌对同一药物敏感性差异的试验
• 2.2.5 不同血清型副鸡嗜血杆菌外膜蛋白差异的试验
• 3 结果
• 3.1 不同血清型副鸡嗜血杆菌生长特性差异的研究
• 3.1.1 不同血清型副鸡嗜血杆菌不同时间OD600 的测定
• 3.1.2 不同血清型副鸡嗜血杆菌生长曲线的绘制
• 3.2 不同血清型副鸡嗜血杆菌致病性试验
• 3.2.1 A 型菌的致病试验结果
• 3.2.2 B 型菌的致病试验结果
• 3.2.3 C 型菌的致病试验结果
• 3.3 不同血清型副鸡嗜血杆菌对同一药物敏感性差异的试验结果
• 3.3.1 副鸡嗜血杆菌在不同连翘提取物浓度下的生长曲线
• 3.3.2 副鸡嗜血杆菌在不同连翘提取物浓度下校正的生长曲线
• 3.4 不同血清型副鸡嗜血杆菌外膜蛋白差异的试验结果
• 3.4.1 不同血清型副鸡嗜血杆菌外膜蛋白定量结果
• 3.4.2 不同血清型副鸡嗜血杆菌外膜蛋白在双向电泳图谱上的结果
• 4 讨论
• 4.1 不同血清型副鸡嗜血杆菌生长特性的差异
• 4.2 不同血清型副鸡嗜血杆菌致病性的差异
• 4.3 不同血清型副鸡嗜血杆菌对药物的敏感差异
• 4.4 不同血清型副鸡嗜血杆菌外膜蛋白的差异
• 5 结论
• 参考文献
• 作者简历
• 致谢