基因枪转多基因杨树的获得

论文摘要

杨树是世界上重要的经济树种，又是林木基因工程研究的模式树种。虽然已有许多杨树遗传转化成功的报道，但获得的理想植株并不多。究其原因，首先是自然界生物的多数性状往往是由多基因控制的，多数的遗传转化研究是将一个或两个外源基因转入受体杨树。为了达到培育高产、优质、多抗等性状的品种目的，需要把三个或更多有用基因导入杨树中，进行多基因操纵。 本研究通过基因枪共转化方法将枯草杆菌果聚糖蔗糖酶基因（SacB）、透明颤菌血红蛋白基因（vgb）、双价抗蛀干害虫基因（BtCry3A+OC-I）、调节基因JERFs等外源基因导入库安托杨（P．×euramericacana‘Guariento’）和银腺杂种杨（P．alba×P．glandulosa）中，结果如下： 1．卡那霉素筛选。共获得27株库安托杨抗性植株和41株银腺杂种杨抗性植株。 2．点杂交。结果表明，27株抗性株库安托杨中共有18株检测到阳性信号，检出率占66.7％。41株抗性株银腺杂种杨中共有29株检测到阳性信号，检出率占70.7％。此外，许多系号未能检测到阳性信号。其中库安托杨中含5个外源基因的株系有8株，3个外源基因的株系有7株，含2个外源基因的株系有2株，1个外源基因的株系有1株。银腺杂种杨中含5个外源基因的株系有8株，含4个外源基因的株系有6株，含3个外源基因的株系有6株，2个外源基因的株系有2株，1个外源基因的株系有7株。 3．Southern杂交。依据点杂交结果，对含有全部外源基因的库安托杨抗性株进行了Southern杂交，结果表明，其中7株含有上述全部外源基因。 4．Bt-Cry3A ELISA实验。依据点杂交结果，对含有全部外源基因的库安托杨抗性株进行了Bt-Cry3A ELISA实验，结果表明，上述7株库安托杨Cry3A基因已得到表达。

论文目录

• 目录
• 摘要
• Abstract
• 综述部分
• 1 杨树基因工程研究现状及发展趋势
• 1.1 杨树基因工程的现状
• 1.1.1 杨树抗虫基因工程
• 1.1.2 杨树抗病基因工程
• 1.1.3 杨树抗除草剂基因工程
• 1.1.4 杨树抗环境污染基因工程
• 1.1.5 杨树抗旱耐盐基因工程
• 1.1.6 杨树抗冻基因基因工程
• 1.1.7 杨树抗涝基因工程
• 1.1.8 杨树木质素改良基因工程
• 1.1.9 杨树雄性不育基因工程
• 1.1.10 杨树基因的表达和调控研究
• 1.2 现阶段杨树基因工程研究特点
• 1.3 杨树基因工程研究发展趋势
• 1.3.1 多基因操纵的途径及方法
• 1.3.2 多基因操纵发展的方向
• 实验部分
• 2 转多基因杨树的获得
• 2.1 转多基因杨树抗性植株的获得
• 2.1.1 材料与方法
• 2.1.2 结果与分析
• 2.2 多基因抗性植株的分子检测
• 2.2.1 材料和方法
• 2.2.2 结果与分析
• 2.3 小结
• 结论与讨论
• 今后工作设想
• 论文撰写情况
• 参考文献
• 致谢