洋葱皮黄酮酶法辅助提取、纯化及体外抗氧化研究

论文摘要

洋葱（Allium cepa L.）为百合科葱属草本植物,主产于我国山东、新疆、甘肃等省区。洋葱是我国主要出口蔬菜,但其出口加工过程中产生大量外皮,造成环境污染和资源浪费。洋葱皮含有丰富黄酮,具有抗氧化、抗肿瘤、清除自由基、防治心血管疾病等作用。本文研究了洋葱皮黄酮的酶法辅助提取和体外抗氧化性,初步了检测洋葱皮黄酮的性质。主要取得以下结果:1.洋葱皮黄酮酶法提取最佳技术条件为:料水比1:40（g/mL）、纤维素酶用量0.52%、pH5.0、时间105 min、温度48℃,此时洋葱皮黄酮的提取率可达到2.32%。2.从6种大孔吸附树脂中选择X-5型树脂对洋葱皮黄酮进行吸附和解吸附试验,确定X-5树脂最佳吸附解吸条件为:吸附流速为2mL/min,上样溶液pH为5.0,上样液浓度为0.5mg/mL,用50mL 80%乙醇作为洗脱液,洗脱流速为l mL/min。3.采用重结晶进一步纯化洋葱皮黄酮,纯度可达94.5%。HPLC分析表明:重结晶后得到的洋葱皮黄酮中槲皮素、山奈酚的含量分别为51.45%、0.39%,占纯化物中黄酮的量为54.4%和0.41%。4.洋葱皮黄酮粗提物清除DPPH自由基、·OH和NO2-的IC50分别为3.751μg/mL、4.267μg/mL、89.093μg/mL。经X-5型树脂纯化后的洋葱皮黄酮清除DPPH自由基、·OH和NO2-的IC50分别为5.633μg/mL、5.675μg/mL、242.250μg/mL。DPPH自由基清除力强弱顺序为:茶多酚>洋葱皮黄酮粗提物>纯化后洋葱皮黄酮>Vc;对·OH抑制能力大小为:茶多酚>洋葱皮黄酮粗提物>纯化后洋葱皮黄酮>Vc;还原力大小顺序为:洋葱皮黄酮粗提物>茶多酚>Vc>纯化后洋葱皮黄酮;对NO2-的清除强弱顺序为:洋葱皮黄酮粗提物>茶多酚>Vc>纯化后洋葱皮黄酮。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 文献综述
• 1.1 前言
• 1.1.1 洋葱以及洋葱皮的营养成分
• 1.1.2 我国洋葱的加工现状及发展
• 1.2 洋葱皮黄酮的提取与分离纯化
• 1.2.1 酶法提取洋葱皮黄酮
• 1.2.2 大孔吸附树脂分离纯化黄酮类物质
• 1.3 洋葱皮黄酮的成分分析
• 1.4 本课题研究的意义和主要内容
• 1.4.1 研究意义
• 1.4.2 研究的主要内容
• 第二章 纤维素酶法辅助提取洋葱皮黄酮技术研究
• 2.1 材料与方法
• 2.1.1 材料与试剂
• 2.1.2 仪器
• 2.1.3 方法
• 2.2 结果与分析
• 2.2.1 洋葱皮黄酮提取的单因素试验结果
• 2.2.2 中心组合试验设计结果分析
• 2.3 小结
• 第三章 大孔吸附树脂分离纯化洋葱皮黄酮研究
• 3.1 材料与方法
• 3.1.1 材料与试剂
• 3.1.2 仪器与设备
• 3.1.3 方法
• 3.2 结果与分析
• 3.2.1 大孔吸附树脂的筛选
• 3.2.2.HPD-600 和X-5 树脂静态吸附动力学曲线
• 3.2.3.HPD-600 和X-5 树脂静态解吸动力学曲线
• 3.2.4 上柱流速对X-5 树脂吸附的影响
• 3.2.5 上柱液pH 对X-5 树脂吸附的影响
• 3.2.6 上柱样液黄酮浓度对X-5 树脂吸附的影响
• 3.2.7 乙醇浓度对洗脱效果的影响
• 3.2.8 洗脱流速对洗脱效果的影响
• 3.2.9 X-5 树脂动态洗脱曲线
• 3.2.10 纯化前后黄酮纯度的比较
• 3.3 小结
• 第四章 洋葱皮黄酮体外抗氧化活性的研究
• 4.1 材料与方法
• 4.1.1 材料与试剂
• 4.1.2 仪器与设备
• 4.1.3 方法
• 4.2 结果与分析
• 4.2.1 洋葱皮黄酮的定性分析
• 4.2.2 洋葱皮黄酮对DPPH 自由基清除效果
• 4.2.3 洋葱皮黄酮对·OH 自由基清除效果
• 4.2.4 洋葱皮黄酮还原力的测定
• 4.2.5 洋葱皮黄酮对亚硝酸盐的清除效果
• 4.3 小结
• 第五章 结论
• 5.1 结论
• 5.2 论文创新点
• 参考文献
• 致谢
• 作者简介