论文摘要
目的： 多项动物实验行为检测结果表明，脑发育期暴露于双酚A可影响与脑多巴胺系统有关的行为如多动症等，而导致这些行为改变的机理目前还不清楚。本研究分别采用原代培养的胎鼠脑多巴胺神经元和围生期双酚A暴露的动物模型，从基因、细胞和整体动物水平探讨双酚A影响大鼠雄性子代脑多巴胺神经系统发育和功能的机理。 方法： 第一部分体外实验：用原代培养的胎鼠脑多巴胺神经元探讨双酚A对神经细胞的损伤机制。 1．建立胎鼠脑多巴胺神经元无血清体外培养模型：取孕14～15天SD大鼠的胎仔，以DMEM／F12含血清培养基接种，体外培养1天后换为Neurobasal+B27的无血清培养基，以后隔日换液。分别于体外培养第4天和第7天时用GFAP、NSE、TH免疫组化鉴定细胞类型、神经细胞纯度和其中多巴胺神经元的比例；经多次实验后使操作过程、培养条件和多巴胺神经元的比例达到稳定。 2．用MTT试验探讨双酚A对神经细胞的毒性作用和确定进一步实验采用的剂量范围； 3．双酚A对神经细胞的氧化损伤作用检测：细胞于体外分别培养4天和7天后，分别加入0，1，10，25，50，100μM双酚A，继续培养24h和
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