Furin及PC7在小鼠胚胎植入和人滋养层侵润过程中作用的研究

论文摘要

胚胎植入是一个受到精确调控的生理事件,是哺乳动物成功受孕的关键环节。胚胎植入过程中发生了一系列形态上和生理上的变化,其中非常重要的包括子宫内膜基质细胞蜕膜化以及滋养层细胞的侵润等等。PCs是一类非常重要的蛋白前体加工酶,在胚胎发育、肿瘤发生和疾病的发展过程中发挥重要的作用。PCs中的Furin和PC7在胚胎植入过程中的表达和调控机制尚未见报道。本研究主要通过小鼠围植入期子宫和植入前胚胎材料和人妊娠各期胎盘绒毛材料,用免疫组化的方法研究了Furin和PC7的时空表达。通过小鼠胚胎-子宫内膜上皮细胞共培养体系研究了Furin抑制剂对胚胎粘附扩展的影响;通过RNAi方法研究了Furin对人滋养层细胞侵润能力的影响。小鼠模型的研究结果显示:Furin和PC7在妊娠D1-D4小鼠子宫的腺上皮、D5-D7的蜕膜和腺上皮中高表达;PC7在植入前胚胎的2-细胞和4-细胞期表达低,8-细胞期表达开始增加,囊胚期滋养外胚层有显著的高表达。此外,Furin抑制剂Dec-RVKR-CMK可显著抑制共培养体系中胚胎的粘附和扩展。以上结果表明,Furin和PC7在植入期胚胎的粘附和扩展中发挥重要作用,并可能参与子宫内膜蜕膜化和胚胎发育。在人妊娠各期胎盘绒毛和转化的滋养层细胞模型中的研究显示:Furin和PC7在人妊娠各期绒毛中均有表达,可以看到Furin的表达在妊娠早期（6-9周）比中期和足月高;而PC7的表达在妊娠各期没有明显的变化。PCs家族成员中除PC1和PC2未在HTR8/Svneo细胞中检测到,其余的PCs均在该细胞中表达。免疫荧光结果显示,Furin主要定位在细胞质。通过瞬时转染Furin RNAi片段到HTR8/Svneo细胞中发现,细胞的侵润能力明显下降。以上结果表明,PCs可能与妊娠早期人滋养层细胞的高度侵润和增殖特性有关,且Furin参与了胚胎植入过程中的滋养层细胞侵润,对于胚胎正常植入起非常重要的作用。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 文献综述
• 前言
• 第一节 胚胎植入研究进展
• 第二节 Proprotein Convertase家族及其功能
• 第三节 RNA干扰及其在哺乳动物细胞中的研究应用
• 第二章 研究论文
• 前言
• 第一节 蛋白前体加工酶（Proprotein Convertases,PCs）Furin和PC7对小鼠胚胎植入的影响
• 摘要
• 1 实验材料和方法
• 2 实验结果
• 3 讨论
• 图版
• 第二节 PCs在人妊娠各期胎盘绒毛中的表达及对人滋养层细胞侵润的影响
• 摘要
• 1 实验材料和方法
• 2 实验结果
• 3 讨论
• 图版
• 结论
• 参考文献
• 附件1 缩略词
• 附件2 主要仪器与试剂
• 个人简历及硕士期间发表论文目录
• 致谢