论文摘要
提取中国长白山乌苏里蝮蛇毒腺mRNA,逆转录合成cDNA,并以其为模板,进行PCR 扩增,PCR 产物克隆入pGEM-T Easy 载体并进行了序列分析。结果显示,乌苏里蝮蛇前金属蛋白酶原基因开框读码序列由1434bp 组成,编码478 个氨基酸。由核苷酸顺序推导的氨基酸序列可以看出,前金属蛋白酶原基因最初的翻译产物是酶原前体;依次含有18 氨基酸组成的信号肽,171 个氨基酸组成的酶原区和由289 个氨基酸组成的前金属蛋白酶原基因(200 个氨基酸组成的金属蛋白酶结构域、16 个氨基酸组成的间隔区和73 个氨基酸组成的解整合蛋白结构域)。乌苏里蝮蛇前金属蛋白酶原的金属蛋白酶结构域含有3 对二硫键;解整合蛋白结构域含有6 对二硫键和特征性RGD(精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸)结构。其基因序列和结构域组成与GenBank 中蛇毒金属蛋白酶/解整合蛋白呈现高度同源性属于PⅡ。氨基酸序列blast 比对发现,酶原区和解整链蛋白结构域呈现极高的同源性,而金属蛋白酶结构域却出现了极高的变异,推测这些变异结构区是为了适应不同的底物、不同受体或同一受体的不同结构域。
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