论文题目: 新抗生素万隆霉素对黄瓜疫病菌的作用机理研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 发酵工程
作者: 高向阳
导师: 姚汝华
关键词: 灰色变异链霉菌,万隆霉素,黄瓜疫病菌,作用机理
文献来源: 华南理工大学
发表年度: 2005
论文摘要: 万隆霉素是我国拥有自主知识产权的有效防治植物真菌（卵菌）病害的广谱抗生素，其有效成分经结构鉴定为含两个2-羧基-喹喔啉发色团的环缩肽类新结构化合物。本文对新农抗万隆霉素产生菌GAAS 2507进行菌种的分类鉴定和以植物病原真菌（黄瓜疫病菌）作为研究对象，从细胞、亚细胞、分子水平上研究其作用机理，结果如下： 通过对万隆霉素产生菌株GAAS 2507的形态特征、培养性状、生理生化特性、全细胞壁化学组分以及16S rDNA序列进行的多相分类研究，明确该菌株是放线菌目（Actinomycetales），链霉菌科（Streptomycetaceae），链霉菌属（Streptomyces）中灰色变异链霉菌（Streptomyces griseovariabilis）的一个亚种，我们将其命名为Streptomyces griseovariabilis subsp. Bandungensis subsp. nov.（灰色变异链霉菌万隆亚种）；万隆霉素产生菌株GAAS 2507的16S rDNA序列已被GenBank核酸数据库收录。 结合黄瓜疫病病害发生特点，从植物病理和微生物学的角度探讨了万隆霉素防治黄瓜疫病菌病害的作用机理，发现万隆霉素不仅可以很好地抑制黄瓜疫病菌的菌丝生长及其致病性，而且还对黄瓜疫病菌游动孢子囊的形成、游动孢子的产生、休眠孢子的萌发及其致病性均有抑制作用，对游动孢子还具有杀死作用。 从细胞水平上探索万隆霉素抑菌作用的机理。在万隆霉素作用下，黄瓜疫病菌菌丝生长缓慢，菌丝的生长受到明显的抑制，在光学显微镜下观察到菌丝肿胀、变形、原生质体凝集的现象；扫描电镜观察到菌丝体膨胀、肿胀后萎焉、疲软、皱缩、变形，菌体表面粗糙、皱缩，新生菌丝体变形、畸形等异常形态学变化；透射电镜下观察到菌体断面结构不清、细胞内成份固缩成团块状并形成空白区，但是菌丝体外形基本完整，未观察到孔洞、破裂。 通过对万隆霉素作用下黄瓜疫病菌菌丝体和孢子内物质的泄漏进行研究，结果表明万隆霉素能引起K+、Mg2+泄漏，但所引起的紫外吸收物质的泄漏并不明显。说明万隆霉素作用的初级效应是黄瓜疫病菌菌丝体和孢子外被的离子通透性的改变，但该作用并不直接引起菌丝体和孢子外被的穿孔、破裂，胞内物质的泄漏，菌丝体和孢子的解体死亡。 万隆霉素对黄瓜疫病菌孢子和菌丝体的有氧呼吸有很强的抑制作用，随着万隆霉素浓度的增加，其耗氧百分率愈少，其呼吸作用从起始到停止经历的时间愈短；同时万隆霉素能明显抑制其NADH氧化酶的活性。因此，万隆霉素对黄瓜疫病菌孢子和菌丝体氧呼吸的抑制作用是其对它们有明显抑制作用的重要原因。
论文目录:
摘要
ABSTRACT
英文缩写词表
第一章 绪论
1.1 多肽类抗生素的分类和特征
1.1.1 多肽抗生素的分类
1.1.2 多肽抗生素的特征
1.2 多肽抗生素非核糖体生物合成模式
1.2.1 多肽抗生素非核糖体合成过程
1.2.2 肽合成酶系标准的组件排列
1.3 环状多肽抗生素短杆菌肽S的研究进展
1.3.1 生物合成
1.3.2 生物学效应
1.3.3 作用机理
1.3.4 构效关系
1.4 喹喔啉环状缩肽抗生素的研究进展
1.4.1 生物活性
1.4.2 生物合成
1.4.3 作用机制
1.4.4 人工合成
1.4.5 展望
1.5 本文立题背景及研究内容
1.6 本课题的创新之处
第二章 新抗生素万隆霉素产生菌的分类鉴定
2.1 引言
2.2 材料与方法
2.2.1 材料
2.2.2 主要仪器及化学试剂
2.2.3 实验方法
2.3 结果
2.3.1 形态特征
2.3.2 培养性状
2.3.3 生理生化特性
2.3.4 细胞壁化学类型
2.3.5 PCR扩增的结果
2.3.6 菌株16S rDNA序列测定结果
2.3.7 菌株16S rDNA序列分析
2.4 讨论
2.5 本章小结
第三章 万隆霉素对黄瓜疫病菌菌丝和孢子的抑制作用及病害的防治效果
3.1 引言
3.2 材料与方法
3.2.1 材料
3.2.2 主要仪器及化学试剂
3.2.3 方法
3.3 结果
3.3.1 万隆霉素对黄瓜疫病菌菌丝生长的影响
3.3.2 万隆霉素对黄瓜疫病菌游动孢子囊的产生和孢子形成的影响
3.3.3 万隆霉素对黄瓜疫病菌孢子萌发的影响
3.3.4 万隆霉素对黄瓜疫病菌孢子的抑制作用
3.3.5 万隆霉素对黄瓜疫病菌孢子致病性的影响
3.3.6 万隆霉素对黄瓜疫病菌病害的预防作用
3.3.7 万隆霉素对黄瓜疫病菌病害的治疗作用
3.4 分析与讨论
3.5 本章小结
第四章 万隆霉素对黄瓜疫病菌作用的形态学研究
4.1 引言
4.2 材料与方法
4.2.1 材料
4.2.2 主要仪器及化学试剂
4.2.3 方法
4.3 结果
4.3.1 光镜下观察万隆霉素对黄瓜疫病菌菌丝形态的影响
4.3.2 扫描电镜下观察万隆霉素对黄瓜疫病菌菌丝形态的影响
4.3.3 透射电镜下观察万隆霉素对黄瓜疫病菌菌丝内部结构的影响
4.4 分析与讨论
4.5 本章小结
第五章 万隆霉素对黄瓜疫病菌孢子和菌丝体内物质泄漏的影响
5.1 引言
5.2 材料和方法
5.2.1 材料
5.2.2 主要仪器及化学试剂
5.2.3 方法
5.3 结果
5.3.1 紫外吸收物质的泄漏
5.3.2 K~+和Mg~(2+)的泄漏
5.4 分析与讨论
5.5 本章小结
第六章 万隆霉素对黄瓜疫病菌菌丝和孢子呼吸作用的影响
6.1 引言
6.2 材料与方法
6.2.1 材料
6.2.2 主要仪器及化学试剂
6.2.3 方法
6.3 结果
6.3.1 万隆霉素对黄瓜疫病菌孢子呼吸速率的影响
6.3.2 万隆霉素对黄瓜疫病菌菌丝体呼吸速率的影响
6.3.3 万隆霉素对黄瓜疫病菌休眠孢子、萌发孢子和菌丝体NADH氧化酶活力的影响
6.4 分析与讨论
6.5 本章小结
第七章 万隆霉素与金属离子的相互作用
7.1 引言
7.2 材料与方法
7.2.1 材料
7.2.2 主要仪器及化学试剂
7.2.3 方法
7.3 结果
7.3.1 万隆霉素的紫外—可见光谱
7.3.2 五种金属离子对万隆霉素紫外光谱的影响
7.3.3 有机溶剂对万隆霉素荧光光谱的影响
7.3.4 万隆霉素乙醇溶液的荧光光谱
7.3.5 五种金属离子对万隆霉素荧光光谱的影响
7.4 分析与讨论
7.4.1 万隆霉素紫外—可见光谱的研究
7.4.2 万隆霉素的荧光光谱及其测定条件
7.4.3 万隆霉素与金属离子的相互作用
7.5 本章小结
第八章 万隆霉素与DNA的相互作用
8.1 引言
8.2 材料与方法
8.2.1 材料
8.2.2 主要仪器及化学试剂
8.2.3 方法
8.3 结果
8.3.1 万隆霉素与单、双链DNA作用的紫外光谱
8.3.2 万隆霉素与不同浓度双链DNA作用的紫外光谱
8.3.3 单、双链DNA对万隆霉素荧光光谱的影响
8.3.4 Na_2HPO_4对万隆霉素-dsDNA复合物荧光光谱的影响
8.3.5 万隆霉素与DNA作用的凝胶阻滞实验
8.4 分析与讨论
8.5 本章小结
结论与展望
参考文献
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致谢
附录
发布时间: 2006-10-17
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