番茄DR8转基因株系的鉴定

论文摘要

DR8基因是通过差异显示PCR法从番茄果实中分离的果实发育相关基因,该基因属于Aux/IAA类基因,其表达受到乙烯和生长素的调控,预示着该基因不仅与果实的发育和成熟有关,并且可能是与乙烯协同调控果实发育的因子。该课题通过反义抑制途径建立番茄DR8转基因株系,并进一步研究该基因在植株整体形态建成和果实发育中的作用,以明确该基因的功能。该课题的研究内容和相关结果如下:①通过PCR和半定量RT-PCR技术对转基因株系进行鉴定。结果表明:株系58、60、62、106和115均为DR8反义抑制株系,且DR8可调控DR4基因的表达（正调控和负调控）,证实DR8是Aux/IAA类基因,其编码的蛋白质是生长素反应的负调控因子;②对转基因株系进行观测,并在此基础上分析DR8的功能。表型分析结果表明DR8基因通过调控DR4的表达（正调控和负调控）调节果实的发育过程:当DR4受到负调控时,植株着果率提高,果实发育正常;当DR4受到正调控时,植株着果率降低,果实正常发育受阻,导致早期幼果的脱落;此外,DR8基因在植株顶端优势和根系形态建成方面发挥了很重要的调控作用,其编码的蛋白质能抑制侧芽和侧根的产生;DR8基因还在叶片形态建成方面发挥重要的调控作用,能调控细胞的分裂、分化和生长以影响叶片形态和维管组织模式。综合以上研究结果,番茄DR8基因属于Aux/IAA类基因,其编码的蛋白质为生长素反应的负调控因子,可调控生长素相关基因的表达。此外,该基因还在果实发育、顶端优势、根系形态建成和叶片形态建成中发挥重要的调控作用。本论文在初步明确DR8基因功能的基础上,对后续的研究工作提出了若干建议。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 1 绪论
• 1.1 植物生长素信号转导研究现状
• 1.1.1 生长素信号的感应
• 1.1.2 生长素信号在细胞质的传递
• 1.1.3 生长素对基因表达的调控
• 1.2 番茄中的 AUX/IAA 基因
• 1.3 研究目的、意义和主要内容
• 1.3.1 研究目的、意义
• 1.3.2 主要研究内容
• 2 番茄DR8 转基因株系的鉴定
• 2.1 引言
• 2.2 材料
• 2.2.1 植物材料
• 2.2.2 主要试剂
• 2.2.3 主要仪器
• 2.2.4 PCR 引物
• 2.3 试验方法
• 2.3.1 转基因植株的 PCR 检测
• 2.3.2 转基因植株的半定量 RT-PCR 检测
• 2.4 结果与分析
• 3 番茄DR8 转基因株系的表型分析
• 3.1 引言
• 3.2 材料
• 3.2.1 植物材料
• 3.2.2 主要试剂
• 3.2.3 主要仪器
• 3.3 试验方法
• 3.3.1 MS 培养基培的配制
• 3.3.2 番茄种子的灭菌与播种
• 3.3.3 番茄幼苗的栽培
• 3.4 结果与分析
• 3.4.1 DR8 转基因植株的表型特征
• 3.4.2 番茄 DR8 基因的功能分析
• 4 结论与展望
• 4.1 主要结论
• 4.2 对后续工作的展望
• 致谢
• 参考文献
• 附录