淡水白鲳尾鳍细胞系论文-俞宏

淡水白鲳尾鳍细胞系论文-俞宏

导读:本文包含了淡水白鲳尾鳍细胞系论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:低温,淡水白鲳,细胞凋亡,活性氧

淡水白鲳尾鳍细胞系论文文献综述

俞宏[1](2006)在《低温诱导淡水白鲳尾鳍细胞CBT凋亡的研究》一文中研究指出淡水白鲳属于喜温性鱼类,水温降至10℃时就出现寒害死亡。本实验室在1997年建立了淡水白鲳尾鳍细胞系CBT,发现该细胞系具有与整体相一致的温度生长特性——10℃胁迫致死,这为探讨喜温性鱼类细胞的寒害机理提供了一个较为理想的研究模型。 本实验以CBT细胞为研究对象,探讨了10℃低温导致淡水白鲳尾鳍细胞系CBT死亡的原因及其可能机制。实验采用CCK—8试剂盒法检测了低温处理前后的细胞存活率;用荧光染料H2DCFDA染色测定细胞内活性氧(ROS)含量的变化;通过亚二倍体峰和Tunel分析检测细胞凋亡,并用琼脂糖凝胶电泳法对死亡细胞的DNA进行了分析;用Hoechst33258染色观察凋亡细胞核形态变化;比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)释放率。实验结果表明,随着CBT细胞受10℃低温作用时间延长,细胞存活率显着下降,细胞内ROS含量和LDH释放率显着增加(P<0.01)。低温处理3d的CBT细胞经流式细胞仪检测出现亚二倍体峰,凋亡率为13%。再经32℃复温12h后,琼脂糖凝胶电泳显示DNA凋亡梯带;Tunel检测,低温处理3d、4d和5d的CBT细胞分别有23.49%,27.72%和35.10%发生凋亡。低温处理5d的CBT细胞核分裂成多个小核,呈现出典型的凋亡小体的形状。维生素E浓度梯度显示,维生素E对低温处理的CBT细胞有明显的保护作用,能明显改善细胞活力和LDH的释放现象,且在50μM至1000μM浓度范围内,该保护作用呈剂量依赖性。由此认为,10℃低温能诱导CBT细胞凋亡。ROS参与了10℃低温致CBT细胞损伤及凋亡过程。(本文来源于《浙江大学》期刊2006-06-01)

严文静,陈汉民,赵小立,俞宏,张铭[2](2005)在《低温诱导淡水白鲳尾鳍细胞系早期凋亡》一文中研究指出淡水白鲳属喜温性鱼类,本文以其尾鳍细胞系CBT为研究材料,探讨低温胁迫(10℃)对细胞的影响。实验采用MTT法测定细胞活力,透射电子显微镜观察超微结构,激光扫描共聚焦显微镜检测磷脂酰丝氨酸(PS)对翻和线粒体膜电位的变化。结果显示:低温处理导致细胞活力和线粒体膜电位显着下降(P<0.01);电镜下可见核质过聚等现象;10℃处理3d,Annexin-V-FITC/PI双染表明87.7%的细胞进入早期凋亡。由此认为,冷胁迫淡水白鲳CBT细胞致死的途径是细胞凋亡。(本文来源于《实验生物学报》期刊2005年02期)

严文静[3](2004)在《淡水白鲳尾鳍细胞系的建立及低温诱导细胞凋亡的研究》一文中研究指出淡水白鲳属于喜温性鱼类,水温降至10℃时就出现寒害死亡。作者以淡水白鲳尾鳍组织为材料,植块培养法建立细胞系,命名为CBT。CBT细胞呈圆形或多边形,多为上皮样细胞,体积较大。核型分析表明,该细胞系的染色体数目是54条,为正常二倍体细胞。 本文以CBT细胞为研究对象,探讨了低温胁迫(10℃)对细胞的影响。实验应用Hoechst33258染色观察细胞形态变化;光学显微镜观察细胞骨架的改变:台盼兰、MTT法测定细胞活力;透射电子显微镜观察超微结构;激光扫描共聚焦显微镜检测磷脂酰丝氨酸(PS)外翻和线粒体膜电位的变化;流式细胞仪检测细胞凋亡亚峰;琼脂糖凝胶电泳观察DNA降解片段。实验结果表明,低温处理导致细胞收缩变圆,失去贴壁能力,伴随着张力纤维断裂破碎;随着低温处理时间的延长,细胞活力和线粒体膜电位显着下降(P<0.01);电镜下可见核质边聚现象,即染色质凝集成块靠近核膜,呈花瓣状、新月状或“8”字形:annexin-V-FITC/PI双染表明冷孵育可直接诱导细胞进入早期凋亡;流式细胞仪检测到10℃处理4d细胞凋亡率为23.04%。而晚期凋亡特征“DNA Ladder”和凋亡小体现象出现在复温阶段(冷孵育5~8d,32℃复温12h)。由此认为,冷胁迫淡水白鲳细胞致死的加04年浙江大学硕士学位论文途径是细胞凋亡,冷孵育可以直接诱导细胞进入早期凋亡,晚期凋亡现象必须经历复温阶段。同时,对冷诱导细胞凋亡机理的初步探讨表明,冷孵育后胞内氧化水平明显升高(P<0.01),抗氧化剂维生素E可以显着保护细胞。结果提示:冷诱导淡水白鳗CBT细胞凋亡可能是由活性氧(ROS)介导的。(本文来源于《浙江大学》期刊2004-06-01)

淡水白鲳尾鳍细胞系论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

淡水白鲳属喜温性鱼类,本文以其尾鳍细胞系CBT为研究材料,探讨低温胁迫(10℃)对细胞的影响。实验采用MTT法测定细胞活力,透射电子显微镜观察超微结构,激光扫描共聚焦显微镜检测磷脂酰丝氨酸(PS)对翻和线粒体膜电位的变化。结果显示:低温处理导致细胞活力和线粒体膜电位显着下降(P<0.01);电镜下可见核质过聚等现象;10℃处理3d,Annexin-V-FITC/PI双染表明87.7%的细胞进入早期凋亡。由此认为,冷胁迫淡水白鲳CBT细胞致死的途径是细胞凋亡。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

淡水白鲳尾鳍细胞系论文参考文献

[1].俞宏.低温诱导淡水白鲳尾鳍细胞CBT凋亡的研究[D].浙江大学.2006

[2].严文静,陈汉民,赵小立,俞宏,张铭.低温诱导淡水白鲳尾鳍细胞系早期凋亡[J].实验生物学报.2005

[3].严文静.淡水白鲳尾鳍细胞系的建立及低温诱导细胞凋亡的研究[D].浙江大学.2004

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