论文摘要
龋病是一种细菌感染性疾病,其中变异链球菌(streptococcus mutans, S.mutans)是最主要的病原菌。本研究在前期100种天然药物抗龋筛选试验的基础上,选择木香、马兜铃、赤芍、稻芽这四种抑菌效果较好的天然药物粗提物,研究它们对S. mutans的体外抑菌、黏附、产酸、产胞外多糖的作用,并分析木香内的有效药物成分及该成分的抑菌效果,为天然药物防龋的进一步开发应用提供科学依据。目的:在前期体外初筛抗S. mutans药物的基础上,选取出对口腔致龋菌的生长有较明显抑制功效的天然药物,通过细菌体外药物实验,观察其对变异链球菌的的抑制效果,为进一步研究天然药物在口腔疾病治疗中的作用奠定基础。方法:提取同一批次不同时间以及不同批次的木香、马兜铃、赤芍、稻芽的药物粗提物,重复实验,采用倍比稀释法测定不同浓度药物粗提物对S.mutans的抑制效果,确定最低抑制浓度(minimum inhibitory concentration, MIC),并测定各种药物粗提物对S.mutans产酸、黏附及产胞外多糖能力的影响。利用高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography ,HPLC)分析木香粗提物中的药物成分及其含量,再使用该成分的标准品进行S.mutans抑菌试验,观察其对细菌的抑制效果。结果:1.应用不同浓度木香、马兜铃、赤芍、稻芽粗提物进行变异链球菌的生长抑制试验,得出当木香、马兜铃、赤芍粗提物药液浓度≥12.50mg/ml、稻芽粗提物药液浓度≥6.25mg/ml时,对变异链球菌的生长具有抑制作用(P<0.05)。2.应用此四种药物粗提物进行变异链球菌黏附作用的影响实验,发现当木香、马兜铃、赤芍、稻芽粗提物浓度分别≥6.25mg/ml、3.13mg/ml、3.13 mg/ml、0.78mg/ml时,与对照组相比具有明显的抑制变异链球菌的黏附作用(P<0.05)。3.应用此四种药物粗提物进行抑制变异链球菌产酸作用的实验,结果得当木香、马兜铃、赤芍、稻芽粗提物浓度分别≥3.13mg/ml、1.56mg/ml、3.13mg/ml、0.39mg/ml时,与对照组相比具有明显的抑制变异链球菌产酸的作用(P<0.05)。4.应用此四种药物粗提物进行抑制变异链球菌合成胞外可溶性及不溶性多糖作用的实验发现:当木香、赤芍粗提物浓度分别≥6.25mg/ml、3.13mg/ml时,与阳性对照组相比具有明显的抑制变异链球菌产生可溶性胞外多糖的作用(P<0.05);当马兜铃、赤芍、稻芽粗提物浓度分别≥0.78mg/ml、6.25mg/ml、0.39mg/ml时,与阳性对照组相比具有明显的抑制变异链球菌产生不溶性胞外多糖的作用(P<0.05 )。5.将木香粗提物样品用HPLC进行分析,色谱图可得木香粗提物样品中含有去氢木香内酯及木香烃内酯两种成分,将不同浓度的两种标准品用以变异链球菌的生长抑制试验,结果发现,当去氢木香内酯标准品浓度≥0.441mg/ml、木香烃内酯浓度≥0.227mg/ml时,两种标准品对变异链球菌的生长具有抑制作用(P<0.05)。结论:1.木香、马兜铃、赤芍、稻芽粗提物对变异链球菌的生长有抑制作用,并可不同程度的降低变异链球菌的黏附、产酸、产胞外多糖的作用。2.木香粗提物内含有去氢木香内酯及木香烃内酯两种药物成分,这两种成分均可对变异链球菌的生长起到一定的抑制作用。