论文摘要
研究背景 河南省林州地区(原林县)及其毗邻的辉县、安阳等地是我国也是世界上食管癌发病率和死亡率最高的地区，显著性地域性分布是食管癌突出的流行病学特征，高低发区人群食管癌死亡率和发病率相差可达500倍，预后极差，中晚期患者5年生存率仅10％左右。尽管早期食管癌5年生存率大于90％，但目前用于食管癌早期诊断和人群筛查的手段有限，胃镜普查虽然有助于食管癌早期发现，但是由于耗资、耗时和耐受性问题，难于在高发区无症状人群中广泛推广。老一代科学家通过人群普查和随访，对林州高发区进行了多学科、系统性综合研究，发现食管癌变是一多阶段进行性发展过程，明确提出食管癌前病变概念。但是，目前该地区人群食管癌发病率和死亡率仍未得到根本改善，甚至无明显影响，仍然是该地区人群肿瘤相关的主要死亡原因，造成这一状况的主要原因是：对食管癌的确切发病因素尚不十分清楚，缺乏有效的Ⅰ和Ⅱ级预防手段和措施；早期食管癌变多阶段演进的分子机制尚不清楚，缺乏敏感、特异的早期诊断和生物防治的指标和方法。
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论文正文：河南食管癌高发区食管癌前病变和癌组织MGMT,XPC,POLB和P53变化特征Ⅰ 论文第一部分 河南食管癌高发区食管癌前病变和癌组织MGMT,XPC,POLB和P53表达改变Ⅰ.1 引言Ⅰ.2 材料与方法Ⅰ.2.1 研究对象Ⅰ.2.2 标本处理Ⅰ.2.3 组织病理学诊断Ⅰ.2.4 组织总RNA、基因组DNA和蛋白质提取Ⅰ.2.5 免疫组织化学检测MGMT,XPC,POLβ和p53蛋白表达Ⅰ.2.6 Western-blot检测MGMT,XPC,POLβ和p53蛋白表达Ⅰ.2.7 RT-PCR检测MGMT,XPC和POLβ基因mRNA表达Ⅰ.2.8 统计学分析Ⅰ.2.9 主要仪器Ⅰ.2.10 主要试剂Ⅰ.3 结果Ⅰ.3.1 病理诊断Ⅰ.3.2 免疫组化检测MGMT,XPC,POLβ和P53蛋白表达Ⅰ.3.3 Western-blot检测MGMT,XPC,POLβ,P53蛋白表达Ⅰ.3.4 RT-PCR检测MGMT,XPC,POLβmRNA表达Ⅰ.3.5 三种不同方法检测MGMT,XPC,POLβ和P53表达比较Ⅰ.3.6 MGMT阴性表达与POLβ、P53阳性表达相关性Ⅰ.3.7 XPC阴性表达与POLβ、P53阳性表达相关性Ⅰ.3.8 MGMT阴性表达与XPC阴性表达相关性Ⅰ.3.9 P53阳性表达与POLβ阳性表达相关性Ⅰ.4 讨论Ⅰ.4.1 MGMT阴性表达Ⅰ.4.2 XPC阴性表达Ⅰ.4.3 POLβ阳性表达Ⅰ.4.4 P53阳性表达Ⅰ.4.5 MGMT阴性表达与POLβ、p53阳性表达相关性Ⅰ.4.6 XPC阴性表达与MGMT阴性表达、POLβ和p53阳性表达相关性Ⅰ.4.7 P53与POLβ阳性表达相关性Ⅰ.4.8 三种不同方法检测基因表达比较Ⅱ 论文第二部分 河南食管癌高发区食管癌前病变和癌组织MGMT和P53变化特征Ⅱ.1 引言Ⅱ.2 材料与方法Ⅱ.2.1 研究对象：Ⅱ.2.2 标本处理Ⅱ.2.3 组织病理学诊断Ⅱ.2.4 组织总RNA、基因组DNA和蛋白质提取Ⅱ.2.5 DHPLC检测基因突变和缺失Ⅱ.2.6 MSP检测MGMT基因启动子区甲基化Ⅱ.2.7 DHPLC检测MGMT基因启动子区甲基化Ⅱ.2.8 统计学分析Ⅱ.3 结果Ⅱ.3.1 病理诊断Ⅱ.3.2 MGMT基因启动子区甲基化检测Ⅱ.3.3 MSP和DHPLC检测MGMT甲基化比较Ⅱ.3.4 P53突变检测Ⅱ.3.5 MGMT基因启动子区甲基化和P53突变关系Ⅱ.3.6 MGMT基因3、5外显子突变Ⅱ.4 讨论Ⅱ.4.1 MGMT基因启动子区甲基化及第3、5外显子突变Ⅱ.4.2 p53突变Ⅱ.4.3 MGMT和p53基因改变关系Ⅱ.4.4 DHPLC技术特征分析Ⅱ.4.5 DHPLC敏感性和特异性Ⅱ.4.6 MSP检测甲基化Ⅱ.4.7 DHPLC检测甲基化Ⅱ.4.8 DHPLC与MSP检测甲基化比较Ⅱ.5 结论Ⅱ.6 创新点Ⅱ.7 参考文献Ⅱ.8 附图后记1：综述Ⅲ 综述 DHPLC技术及其在肿瘤分子生物学研究中的应用Ⅲ.1 引言Ⅲ.2 DHPLC基本工作原理Ⅲ.3 DHPLC检测样品要求Ⅲ.3.1 PCR反应体系Ⅲ.3.2 杂合双链形成Ⅲ.4 工作温度理论预测Ⅲ.5 DHPLC敏感性和特异性Ⅲ.6 DHPLC数据解释Ⅲ.6.1 典型DHPLC色谱图Ⅲ.6.2 变异识别Ⅲ.7 DHPLC实际应用Ⅲ.7.1 微卫星分析Ⅲ.7.2 定量RT-PCRⅢ.7.3 DNA片段长度分析Ⅲ.7.4 SNP发现和确定Ⅲ.7.5 突变检测Ⅲ.7.6 DNA甲基化检测Ⅲ.7.7 引物延伸法Ⅲ.7.8 寡核苷酸的纯化Ⅲ.8 DHPLC应用前景和展望Ⅲ.9 参考文献后记2：REVIEWⅣ REVIEW DNA METHYLATION AND ESOPHAGEAL SOUAMOUS CELL CANCER:SPECIAL REFERENCE TO RESEARCH IN CHINAⅣ.1 INTRODUCTIONⅣ.2 STUDIES OF GENES PROMOTER HYPERMETHYLATION IN SCCⅣ.2.1 p14 ARF,p15,and p16Ⅳ.2.2 The FHIT geneⅣ.2.3 The RARβ2 geneⅣ.2.4 The APC geneⅣ.2.5 The MGMT ReneⅣ.2.6 The E-cadherin geneⅣ.2.7 The TSLC1 geneⅣ.2.8 The RASSF1A geneⅣ.3 METHYLATION IN SERUM FROM THE ESOPHAGEAL CANCER PATIENTSⅣ.4 ABERRANT DNA METHYLATION IS AN EARLY EVENT IN ESOPHAGEAL CARCINOGENESISⅣ.5 HYPERMETHYLATION AS A TARGET OF THERAPEUTIC INTERVENTIONⅣ.6 SIGNIFICANCE OF METHYLATION IN CLINICAL APPLICATIONⅣ.7 CONCLUSION AND PERSPECTIVESⅣ.8 REFERENCESⅤ 中英文缩略词Ⅵ 附录Ⅶ 致谢
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河南食管癌高发区食管癌前病变和癌组织MGMT，XPC，POLβ和p53变化特征
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