Rat/Mouse Hemokinin-1的心血管活性和Human Hemokinin-1的构效关系研究

论文摘要

Rat/mouse hemokinin-1（r/m HK-1）是速激肽家族的成员之一,它在中枢水平对心血管的调节作用目前还没有研究。本实验中,我们通过侧脑室注射r/m HK-1,研究其对麻醉大鼠的平均动脉压（MAP）和心率（HR）的调节作用,并与substance P（SP）（i.c.v.）引发的MAP和HR变化作比较。结果表明,侧脑室注射r/mHK-1（1-100 nmol/kg）,会引发麻醉大鼠的MAP产生剂量依赖性双相变化（即先降压后升压）。其中,降压效应的作用机制是：激活速激肽NK1受体,引发NO的释放,进而抑制脑区交感神经兴奋性,导致MAP降低；升压效应的作用机制是：激活NK1受体后,激活交感神经,引发MAP升高。同时,r/m HK-1 （1-100nmol/kg,i.c.v.）还会引发麻醉大鼠产生剂量依赖性的心动过速效应,NK1受体、交感神经和NO共同调节其过程。相比较而言,SP（10 nmol/kg,i.c.v.）仅能诱导麻醉大鼠MAP升高,其作用机制与r/m HK-1引发的升压作用机制相似。而SP（10 nmol/kg,i.c.v.）诱导麻醉大鼠HR的升高作用机制与r/m HK-1引发的HR升高作用机制有所不同。SP主要是通过NK1受体和交感神经来调控HR的升高,NO并不参与其过程。总的来说,SP和r/m HK-1在中枢心血管系统中具有不同的调控机制,本研究揭示了由新发现的TAC4基因编码的r/m HK-1在中枢系统中的新型调控作用。Tachykinins（TKs）主要是通过激活速激肽受体来发挥药理学活性。在TKs与受体的相互作用中,只有TKs的氨基酸侧链形成与受体相契合的空间构象,才能激活受体。因此,TKs氨基酸序列的变化,会导致TKs的空间构象发生改变,进而影响TKs对受体的选择性激活。本实验主要探讨,在动物整体水平上,human hemokinin-1（h HK-1）的氨基酸序列变化对受体的选择性激活和h HK-1药理学活性的影响。实验中,清醒小鼠侧脑室注射h HK-1及其C端片段（h HK-1（2-11）,hHK-1（3-11）,h HK-1（4-11）,h HK-1（5-11）,h HK-1（6-11）,h HK-1（7-11）,hHK-1（8-11））和N端片段（h HK-1（1-7）,h HK-1（1-9））。结果表明,h HK-1和hHK-1（4-11）（10 nmol/mouse, i.c.v.）可以增加小鼠的甩尾潜伏期,镇痛作用可分别达到90%和51%。然而,h HK-1（2-11）,h HK-1（3-11）,h HK-1（5-11）,h HK-1（6-11）对小鼠的镇痛作用急剧减弱。H HK-1的C端片段h HK-1（7-11）,h HK-1（8-11）和N端片段h HK-1（1-7）,h HK-1（1-9）都不能显著调节小鼠的疼痛。总之,h HK-1的T1、K3、Q6位氨基酸在其结构中具有重要作用。HHK-1的COOH端五肽为激活受体所必须,而NH2端区域传递着配体对受体的选择性信息。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 第一章 综述
• 1. 速激肽家族简介
• 1.1. 速激肽的发现
• 1.2. 速激肽的合成
• 1.3. 速激肽的分布
• 2. 速激肽的受体
• 2.1. 速激肽受体的类型
• 2.2. 速激肽与受体的亲和力
• 2.3. 速激肽受体的分布
• 3. 速激肽的药理学活性
• 3.1. 心血管系统
• 3.2. 痛觉系统
• 3.3. 胃肠运动
• 3.4. 免疫系统
• 3.5. 生殖泌尿系统
• 3.6. 呼吸道
• 3.7. 雌性生殖系统
• 4. 速激肽的构效研究
• 4.1. 速激肽的5位残基
• 4.2. 速激肽的8位残基
• 4.3. 速激肽的6位残基
• 4.4. 速激肽COOH端的三肽替换
• 2端的Pro残基'>4.5. 速激肽NH₂端的Pro残基
• 第二章 Rat/mouse hemokinin-1的心血管活性研究
• 1. 引言
• 2. 实验材料和方法
• 3. 实验结果
• 3.1. r/m HK-1（i.c.v.）和SP（i.c.v.）对麻醉大鼠的MAP和HR调节
• 3.2. 脊椎切断术对r/m HK-1和SP的作用影响
• 3.3. 速激肽NK受体的拮抗剂对r/m HK-1和SP的作用影响
• 3.4. 阿托品、酚妥拉明、普萘洛尔对r/m HK-1和SP的作用影响
• 3.5. 双侧肾上腺切除对r/m HK-1和SP的作用影响
• 3.6. L-NAME对r/m HK-1和SP的作用影响
• 4. 实验讨论
• 第三章 Human hemokinin-1的构效关系研究
• 1. 引言
• 2. 实验材料和方法
• 3. 实验结果
• 3.1. H HK-1的C端片段对小鼠疼痛作用的调节
• 3.2. H HK-1的N端片段对小鼠疼痛作用的调节
• 4. 实验讨论
• 参考文献
• 附录
• 在学期间的研究成果
• 致谢