三氧化二砷对肝癌细胞增殖及血管内皮生长因子表达的影响

论文摘要

目的:研究不同浓度三氧化二砷（As2O3）对人肝癌细胞株HepG2增殖及其表达血管内皮生长因子（VEGF）的影响,并进一步探讨其中可能存在的信号转导机制。方法:本试验在体外培养肝癌HepG2细胞株基础上,分为六组:1)空白对照组;2)不同浓度As2O3 （0.1-7.0μmol/L）组;3)As2O3+H7（PKC阻断剂）组;4)As2O3+PMA（PKC激动剂）组;5)As2O3+SB203580（P38阻断剂）组;6)As2O3+H7+SB203580组。通过噻唑蓝（MTT）比色法检测不同浓度As2O3对HepG2细胞的吸光度,并绘制生长曲线;在此基础上确定3)—6)组适宜As2O3浓度;采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）,检测各组间VEGFmRNA的表达。结果: 1)不同浓度组中,As2O3浓度在0.1-1.0μmol/L内随浓度增加,吸光度（A值）呈递增趋势;浓度为1.0μmol/L时,MTT比色法检测出A值最高。As2O3浓度在2.0-7.0μmol/L内随浓度增加,吸光度（A值）呈递减增趋势;在7.0μmol/L时,MTT比色法检测出A值最低。2)1.0μmol/L、5.0μmol/L、7.0μmol/L浓度As2O3均有VEGFmRNA条带表达,5.0μmol/L处条带最明显,与空白对照相比有显著差异（p<0.01）。3)As2O3+H7组和As2O3+SB203580组中VEGFmRNA的表达分别与空白对照组相比有显著差异（p<0.01）;与As2O3组相比有差异（p<0.05）; As2O3+H7+SB203580组VEGFmRNA的表达与As2O3组相比有显著差异（p<0.01）,与空白对照相比无差异。结论:1)剂量差异:低剂量（≤1.0μmol/L）As2O3可以促进HepG2细胞的增殖,高剂量（≥2.0μmol/L）则可以抑制HepG2细胞增殖。2)As2O3在5.0μmol/L可以诱导HepG2细胞VEGFmRNA表达,可能作用于PKC和/或P38信号通路,从而影响VEGFmRNA的表达。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 材料与方法
• 1 材料
• 1.1 细胞系
• 1.2 主要试剂
• 1.3 王要设备仪器
• 1.4 引物
• 2 实验设计与分组
• 2.1 细胞培养
• 2.2 实验分组
• 3 检测项目
• 3.1 HE 染色检测HepG2 肝癌细胞的形态
• 2O₃对 HepG2 肝癌细胞的影响'>3.2 不同浓度 As₂O₃对 HepG2 肝癌细胞的影响
• 3.3 VEGFmRNA 表达的半定量检测
• 4 统计方法
• 结果
• 1 HE 染色HepG2 肝癌细胞形态
• 2O₃对 HepG2 肝癌细胞的影响'>2 不同浓度 As₂O₃对 HepG2 肝癌细胞的影响
• 3 经不同影响因素处理 HepG2 肝癌细胞总 RNA 的提取
• 2O₃对HepG2肝癌细胞诱导VEGFmRNA表达的 影响'>4 不同浓度As₂O₃对HepG2肝癌细胞诱导VEGFmRNA表达的 影响
• 2O₃诱导VEGFmRNA 表达的影响'>5 PKC信号通路对HepG2肝癌细胞中As₂O₃诱导VEGFmRNA 表达的影响
• 2O₃诱导 VEGFmRNA 表达的影响'>6 P38 信号通路对 HepG2 肝癌细胞中 As₂O₃诱导 VEGFmRNA 表达的影响
• 2O₃ 诱 导 VEGFmRNA 表达的影响'>7 同时阻断 PKC+P38 信号通路 HepG2 肝癌细胞中 As₂O₃ 诱 导 VEGFmRNA 表达的影响
• 讨论
• 小结
• 展望
• 参考文献
• 文献综述
• 作者简历
• 致谢
• 导师评语