论文摘要
背景载脂蛋白A5（ApoA5）是2001年在对人与小鼠的ApoA1/C3/A4基因簇序列进行比较时发现的一个新的载脂蛋白家族成员,是目前发现的第一个过度表达引起甘油三酯（TG）水平下降的载脂蛋白。动物和人类实验研究表明,ApoA5不仅影响血脂代谢,而且与胰岛素水平有一定关联,说明ApoA5与糖、脂代谢密切相关。2型糖尿病常常合并高血糖、高胰岛素血症、高TG血症等糖、脂代谢紊乱,其中心血管并发症是糖尿病患者的主要并发症和致死原因,糖尿病作为冠心病的等危症已为全球所共识。罗格列酮（RSG）是目前临床上用于糖尿病和代谢综合征治疗的有效药物。然而,目前人们对于ApoA5在血清中的水平、调控因素及其临床意义知之甚少,因此研究血清中ApoA5水平,了解其在糖脂代谢中的作用及可能的调节机制有重要意义。目的研究糖尿病大鼠血清ApoA5水平及RSG的影响,糖尿病大鼠肝脏过氧化物酶体增殖激活受体（PPAR）αmRNA和PPAR7 mRNA的表达及RSG的影响;分析血清ApoA5水平与糖脂代谢指标及肝脏PPAR表达的相关性,探讨ApoA5在糖脂代谢中的作用及调控的可能机制。方法采用40只雄性SD大鼠进行动物实验,建立对照组、高脂组、糖尿病组和糖尿病RSG干预组4组动物模型。实验模型建立前采血检测各组大鼠空腹血糖（FBG）、空腹胰岛素（FINS）、稳态模型评价的胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白一胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白一胆固醇（LDL-C）、游离脂肪酸（FFA）。糖尿病大鼠模型的建立参照周氏等方法,给予高脂高糖饲料喂养、腹腔注射链脲佐菌素。应用RSG对糖尿病大鼠干预治疗8周。全部动物实验于第14周结束时集中处死动物,搜集血标本和肝脏组织标本。检测各组大鼠的血FBG、FINS、HOMA-IR、TG、TC、HDL-C、LDL-C、FFA浓度。用双抗体酶联免疫吸附法（ELISA）检测各组大鼠血清ApoA5水平;并与血清FBG、FINS、HOMA-IR、TG、TC、HDL-C、LDL-C、FFA水平进行相关分析。逆转录多聚酶链式反应（RT-PCR）测定各组大鼠肝脏组织PPARa mRNA和PPARqt mRNA的表达;并与血清ApoA5水平进行相关性分析。结果1、与对照组比较,高脂组、糖尿病组和RSG干预组大鼠血清ApoA5明显降低,以糖尿病组降低为甚（P均＜0.05）;而RSG干预组大鼠较糖尿病组血清ApoA5水平有明显升高,差异有统计学意义（P＜0.05）。2、大鼠血清ApoA5水平与TG（r=-0.781,P=0.000）,TC（r=-0.643,P=0.000）,FBG（r=-0.758,P=0.000）,FINS（r=-0.578,P=0.001）,HOMA-IR（r=-0.798,P=0.000）均呈显著负相关;而与HDL-C（r=0.469,P=0.010）呈显著正相关;与LDL-C（r=-0.323,P=0.088）和FFA（r=-0.329,P=0.082）无明显相关性。3、PPARαmRNA和PPARγmRNA在各组大鼠的肝脏均有表达（灰度值比值）。四组大鼠中,以糖尿病组PPARαmRNA表达为最低,PPARγmRNA表达为最高（P均＜0.05）;与糖尿病组比较,RSG干预组PPARαmRNA的表达有升高（P＜0.05）,PPARγmRNA的表达有减低（p＜0.05）。4、大鼠血清ApoA5水平与肝组织PPARαmRNA表达呈显著正相关（r=0.577,P=0.001）;而与肝组织PPARγmRNA表达呈显著负相关（r=-0.593,P=0.001）。结论1、糖尿病大鼠血清ApoA5水平明显下降,罗格列酮可上调血清ApoA5水平;大鼠血清ApoA5水平与TG、TC、FBG、FINS、HOMA-IR水平呈显著负相关,与HDL-C水平呈显著正相关,提示ApoA5参与糖、脂代谢并受罗格列酮的影响。2、PPARαmRNA和PPARγmRNA在大鼠肝脏组织均有表达;以糖尿病组大鼠PPARαmRNA的表达为最低,PPARγmRNA的表达为最高;RSG可调节糖尿病大鼠肝脏PPARαmRNA和PPARγmRNA的表达;血清ApoA5水平与肝脏组织PPARαmRNA呈显著正相关,与肝脏组织PPARγmRNA显著负相关,提示血清ApoA5水平可能与PPAR的调控有关。
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